第2章2+微生物主要类群及其形态结构病毒分析.pptVIP

食品微生物学 2.4.1.2病毒的大小与形态 1、大小：测量病毒大小的单位是纳米（nm）。各种病毒的大小相差很大。 小的病毒直径只有10-20nm左右，例如：口蹄疫的直径22nm；大的病毒直径可超过250nm，例如：痘病毒的大小约为250×300nm； 大多数病毒的直径都在150nm以下。 2、形态：病毒的形态有球状、棒杆状、线状和蝌蚪状等。 2.4.1.3病毒的结构与化学组成 1.病毒粒子的结构 病毒的基本形态结构有三种： (1)螺旋对称-----烟草花叶病毒 (2)二十面体对称-----腺病毒 (3)复合对称-----T4噬菌体 2.病毒的化学组成 绝大多数病毒主要是由核酸、蛋白质组成，只有少数病毒除上述成分外，还含有脂类、多糖等物质。 2.4.1.4病毒的主要类型 病毒的种类： 1、按照结构分类： ① 裸露病毒； ② 囊膜（包膜）病毒； 2、按照寄生性分类： (1) 微生物病毒 (2) 植物病毒 (3) 细菌病毒（噬菌体） (4)脊椎动物病毒 (5)昆虫病毒 3.病毒结构示意图 2.4.1.5亚病毒因子 亚病毒是一类比病毒更为简单，仅具有某种核酸不具有蛋白质，或仅具有蛋白质而不具有核酸，能够侵染动植物的微小病原体。他不具有完整的病毒结构的一类病毒称之为亚病毒，包括 1.类病毒、2.卫星RNA、3.朊病毒。 2.4.2噬菌体 噬菌体（Phage）是一种侵染细菌的微生物病毒，广泛分布于自然界中。由于噬菌体在发酵工业中的危害较为突出而引起人们的广泛重视。 人们对大肠杆菌T—系噬菌体进行了大量的研究，获得了有关病毒的基础知识。因为它是一个很方便的生物模型和独特的研究工具，因为它是一个单细胞的宿主和很简单的寄生物。 2.4.2.1噬菌体的形态 同其它病毒一样，噬菌体由核酸和蛋白质组成，核酸的单链或双链分子组成环状或线状，病毒的外壳有不同的形状和大小。 基本形态有：蝌蚪形，微球形，线状。 2.4.2.2噬菌体的生活周期 （一） 噬菌体生长的测定：一步生长曲线 定量描述毒性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。 少量病毒与敏感细胞接触，病毒吸附后，高倍稀释，继续培养，定时取样测定培养物中的病毒效价，以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线 一步生长曲线 1.实验设计依据：1个菌体被1个噬菌体感染,避免二次吸附；细菌群体被噬菌体同步感染。 2.实验过程: 敏感菌10ml 噬菌体(Phage) 1ml 混匀，5min,使之吸附 离心或用抗噬菌体(phage)血清处理, 去除过量噬菌体(phage) 高倍稀释,吸附(噬菌体)phage的菌悬液(避免多次吸附) 37℃培养,定时取样 具体实验方法： 对数生长期的敏感菌悬浮液与适量的噬菌体混合， 混合比例为10︰1（避免几个噬菌侵染一个菌体)） ↓ 数分钟后，加入一定量的噬菌体抗血清，以中和 未被吸收的噬菌体 ↓ 用培养液高倍稀释，以免第二次吸附（感染） ↓培养 含噬菌体样品与敏感菌混合 ↓ 平板培养，计算噬菌斑数 结果可见： 1、潜伏期：吸附后开始一段时间，约5-10min，噬菌体的数量不见增加，说明噬菌体未完成复制和组装。 2、裂解期：感染后20-30min，平板中噬菌斑数量突然直线上升，表示噬菌体已从寄主细胞中裂解释放了。 3、裂解量：每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数称为裂解量。 裂解期平均噬菌斑数 裂解量= —————————— 潜伏期平均噬菌斑数 2.毒性噬菌体 通常把毒性噬菌体看作噬菌体的正常表现。 大肠杆菌T4噬菌体即为毒性噬菌体。 （一）毒性噬菌体侵入宿主细胞的过程： 　五个阶段 　1、吸附：与细胞的特异性受体结合，一种噬菌体吸附后不影响另外一种噬菌体的吸附，例如：大肠杆菌T4噬菌体吸附于细胞后，并不会影响到其它种类的噬菌体在此细胞的吸附。 2、侵入：吸附后，噬菌体的核酸部分注入到细