生命科学与生物技术概论整理（副本）.docVIP

生命（生物体）的基本特征 基因研究是把双刃剑：基因隐私权；基因歧视；减少人类文化多样性；人口膨胀怎么办 基因工程的诞生：三大理论基础：●遗传物质是DNA●DNA双螺旋结构●密码子的通用性 三大技术基础：●限制性内切酶的发现●DNA连接酶的发现●质粒的发现 基因工程：在生物体外，对生物体的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。 基因工程过程：①获得目的基因②目的基因与载体DNA片断的体外连接③将重组DNA分子引入细胞④ 筛选出含有重组子的细胞⑤外源基因的表达,获得所需要的产物 （①目的基因：编码目的产物的基因；例如：人胰岛素基因；人干扰素基因；编码某些酶的基因；植物抗病基因等。方法：印迹法；逆转录合成法；聚合酶链式反应（PCR）。聚合酶链式反应（PCR）是在体外的小试管中通过酶促反应有选择地大量扩增一段目的基因的技术。它把目的基因的寻找和扩增，放在一个步骤里完成。三个步骤：（1）变性（2）退火（3）延伸。②将目的基因片断从细胞内提取需要基因的 ——限制性内切酶。将目的基因与载体连接需要基因的 ——DNA连接酶。限制性内切酶：分布：从细菌中分离得到。 特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有2000多种。举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。DNA连接酶：连接酶的作用：DNA连接酶是将碱基互补配对的两个黏性末端连接起来，封闭DNA链上的缺口，使之成为一个完整的DNA分子。 连接的部位：可以催化DNA链上的5-PO4与3-OH生成磷酸二脂键。可用于将目的基因与载体的DNA连接起来。 基因工程载体：载体是能将目的基因片段送入宿主细胞的工具。可与包含目的基因的外源DNA片段连接构成重组体，并将重组体导入宿主细胞。 常用的载体：细菌或酵母菌的质粒、λ噬菌体。质粒：细菌细胞中自然存在于染色体外可以自主复制的一段环状DNA分子。 转基因生物的安全性：环境安全性：基因的逃逸、扩散造成基因污染；生态平衡的破坏、 超级病虫害的出现。食品安全性：对人类的基因污染；产生过敏原 ③常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、毕赤氏酵母和动植物细胞等。 构造好的重组 DNA 分子导入受体细胞，若受体细胞是细菌称转化，若受体细胞是动/植物细胞，通常称为转染。 ④重组 DNA 分子进入寄主细胞后，其中的目的基因能否表达，表达效率高低，有很大差别。表达：指目的基因编码的蛋白质合成。检测方法：1、特殊标记(蓝白斑、抗药性) 电泳检测是否有所需的DNA片段或蛋白质条带 生物技术是微生物学、分子生物学、生物化学、化学工程等多学科交叉的综合性学科。 1982年，国际合作与发展组织对生物技术的定义为：生物技术是应用自然科学和工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品为社会服务的技术。 生物技术的特点：◆高技术 ◆高投入 ◆高利润 发酵工程定义：现在发酵工程是将微生物学、生物化学和化学工程学的基本原理有机结合起来，利用微生物生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术。 （一）. 细菌 属于原核生物，单细胞生物 ⒈ 形态：球菌、杆菌、螺旋菌三大类，大小0.2-1.5um 其中发酵工业中常见与常用的为球菌与杆菌，尤其是杆菌。2.细菌细胞的结构：一般构造包括：细胞壁、细胞膜、细胞质、间体、核糖体、核区、内含物颗粒。部分细菌具有特殊结构：夹膜、鞭毛、线毛、芽孢。 根据细菌细胞壁结构的不同可分为革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌。4.细菌的繁殖:细菌一般采用无性繁殖5.重要的细菌乳酸杆菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、醋酸杆菌、丙酸菌、棒杆菌、假单胞菌、甲烷菌、氧化亚铁硫杆菌。6.用途:广泛应用于食品、医药、轻工业、农业、化工、能源、环保、选矿。 （二）放线菌1、放线菌是一种原核生物，以菌落呈放射状而得名。2、分布：放线菌在自然界分布很广，主要习居于土壤之中，中性、偏碱性的土壤和有机质丰富的土壤中较多。土壤特有的泥腥味主要由放线菌的代谢产物引起的。3、结构：基内菌丝—长在培养基内，吸收营养;气生菌丝—向培养基上空伸展;孢子丝 —气生菌丝分枝部分具有形成;孢子作用的繁殖菌丝◆放线菌的孢子常具有色素，呈白、灰等颜色，是分类的重要特征之一。◆菌落由菌丝体组成，放线菌的气生菌丝，较细，生长缓慢，菌丝分枝交错缠绕，故菌落质地致密菌丝长在培养基内，不易挑起。4、繁殖方式：以无性方式繁殖，主要是孢子丝通过横隔分裂形成孢子，也可通过菌丝断片繁殖，有些放线菌的菌丝上可形成孢子囊，孢囊成熟