裂果易发性不同的荔枝品种果皮中细胞壁代谢酶活性的比较.pdfVIP

植物生理与分子生物学学报，Journal ofPlant Physiology and Molecular Biology 2003，29(2)：141—146 141 裂果易发性不同的荔枝品种果皮中细胞壁代谢酶活性的比较 李建国 黄旭明 黄辉白 (华南农业大学园艺学院，广州 510642) 摘要 ：“糯米糍”荔枝裂果率极显著高于“淮枝”，前者 果皮中的果胶酶、纤维素酶和果胶 甲酯酶的活性 高于 后者，其中以果胶酶 活性 差异最明显 ，其 次是 纤维素 酶 ，果胶甲酯酶差异最小；“糯 米糍 ”细胞壁 结合型 的 过氧化物酶 (POD)和 多酚氧化酶 (PPO)活性明显 高于“淮枝 ”，而水溶性 POD和 PPO的活性则 两个 品 种 间无明显差异。据此认 为，果皮细胞壁水解酶 活性 以及细胞壁结合型的 POD和 PPO的活性 高的荔枝 品 种，其裂果率也高。文章对细胞壁代谢相关酶类在果 皮抗裂性形成 中的作用进行 了讨论。 关键词：荔 枝 (Litchi chinensis Sonn．)；裂果 ；果胶 酶 ； 果胶 甲酯酶；纤维素酶；过氧化物酶 ；多酚氧化酶 中图分类号 ：Q945 裂果普遍存在于各类果实之中，田间表现是果 皮和果肉的一部分开裂 ，其实质是果实发育过程中 一 种生理失调现象。裂果发生后，果实膨大生长速 率迅速下降，成熟过程的一系列生理生化变化不能 进行 ，果实不具商品价值。荔枝的采前裂果是生产 中的一个大难题 ，早已成为我国发展优质荔枝商品 生产的障碍，给生产者造成极大的经济损失。事实 上 ，不同荔枝品种之间的裂果率差异很大 ，如我 国 特有的著名品种“糯米糍 ”，一般年份的裂果率为 20％ 一30％，严重年份高达 50％以上；而同属晚熟 品种的“淮枝”，其裂果率一般低于 5％(李建国和 黄辉白 1996)。 为了解决荔枝裂果问题 ，多年来我们已经从水 分、矿质营养和果皮理化性质等方面进行了大量研 究(李建国等 1992；李建国和黄辉白 1994，1995)； 后来又从果皮细胞壁强度较新的视界来探索 ，发现 果皮细胞壁成分越高的品种 ，果皮强度越大，裂果 率越低(Huang等 1999)。但有关与果皮细胞壁代 谢相关的水解酶和氧化酶类的活性与荔枝裂果的 关系还未见报告。本研究主要是报告这方面的试 验结果 ，以期加深认识荔枝裂果的生理机制并为防 裂技术的研发提供理论依据。 1 材料与方法 1．1 试验材料 荔枝(Litchi chinensis Sonn．)选 自广东省东莞 虎门镇永丰荔枝园，品种为 10年生的“糯米糍”和 “淮枝”。于 1999年和2000年 ，每品种各选树势大 体相近、花期和成熟期一致的树 10株进行裂果率 调查。每品种于 2000年选其 中 3株进行果实 (每 株选代表性果实 10个)采样，花后 80 d为果实采 收期，每株为 1个样品，重复 3次。样品用冰壶带 回实验室后贮于 一20℃冰箱中以备测定酶活性。 1．2 裂果率的调查方法 在裂果发生期间，每株选代表性的枝条 10个 挂牌统计总果数和裂果数 ，每次统计完毕即摘除裂 果。裂果率(％)=(每次裂果数之和／第 1次调查 时总果数)×100％。 1．3 果胶酶(PG)活性的测定 参照谭兴杰 等 (1985)以及 Pathak和 Sanwal (1998)的方法 ，取 0．75 g荔枝果皮 ，加入4 mL冷 的 0．04 mol／L pH 6．0的醋酸钠缓冲液 ，冰浴研磨 匀浆 ，低温 (4℃)下提取 1 h，然后在低 温 (4℃) 下，11 000×g离心 20 min，上清液作为待测粗酶 液。 反应系统包括 0．2 mL 0．04 mol／L pH 4．6的 醋酸钠缓冲液，0．3 mL 1％多聚半乳糖醛酸，0．1 mL粗酶液，0．4 mL H20。反应混合物在 37℃下保 温 60 min，然后立 即加入 1 mL DNS终止反应 ，放 人沸水中显色 5 min，立 即放人冷水浴 中使之冷 却。冷却后加入8 mL H 0稀释，摇匀后于540 nm 的波长下比色测定 OD值。用 3，5．二硝基水杨酸 法测定生成的还原糖数量，以 D-半乳糖醛酸为标 样 ，酶活性以 I~mol Ga mg protein h 表示。 1．4 纤维素酶活性的测定 参照宁正祥 (1998)的方法 ，酶液的提取同 PG 酶。活性 的测定 ：取 2 mL 1％ 甲基纤维素加 0．5 mL的酶液 ，于 4o℃下保温 60 min，然后加入 2．5 mL DNS终止反应，放人沸水浴中显色 5 min，立即 用水浴冷却，冷却后加入20 mL H 0稀释，摇匀后 于 540 nm波长下比色测定 OD值。然后用 3，5．二 2002-08-26收到，200