钙调蛋白依赖性蛋白激酶II参与肾上腺素受体.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, February 25, 2013, 65(1): 1–7 1 Received 2012-05-11 Accepted 2012-06-06 This work was supported by High School Science and Technology Fund Planning Project of Tianjin Municipality, China (No. and the Scientific Research Fund of Tianjin Medical University, China (No. 2011ky33). #These authors contributed equally to this work. *Corresponding author. Tel: +86-22 E-mail: zhanglsl@ 氧化应激和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II参与β肾上腺素受体 持久激动引起的大鼠心肌肥厚 刘艳丽，刘 奔#，屈扬扬#，柴慧娟，李 锐，张 玲* 天津医科大学基础医学院生理学与病理生理学系，天津 300070 摘 要：持久激动β肾上腺素受体(β adrenergic receptor, βAR)可导致病理性心肌肥厚，但其机制尚不明确。本研究观察抗氧化 剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)对异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)诱导的心肌肥厚大鼠的心肌氧化应激水平及钙/ 钙调蛋白依赖性蛋白激酶II (calcium/calmodulin-dependent protein kinase II, CaMKII)表达的影响，探讨βAR持久激动诱发心肌 肥厚机制中CaMKII和氧化应激的作用。健康雄性Wistar大鼠，随机分成4组：正常对照组(CTRL)，ISO处理组(ISO)，正常 NAC组(CTRL+NAC)和ISO处理+NAC组(ISO+NAC)，每组6只。ISO及ISO+NAC组动物每天腹腔注射3 mg/kg ISO，CTRL及 CTRL+NAC组腹腔注射相同体积的生理盐水；CTRL+NAC及ISO+NAC组动物每日自由饮用含15 g/L NAC的饮用水。每周用 无创动脉血压仪检测鼠尾动脉血压，连续2周；以心重指数(HW/BW)和左心室组织HE染色检测心肌肥厚情况；荧光测定法 检测心肌线粒体活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平；Western blot检测左室心肌NADPH氧化酶4 (NADPH oxidase 4, NOX4)以及有活性的CaMKII (p-CaMKII/CaMKII)的表达变化。结果显示，与CTRL组相比，ISO组大鼠出现明显的心肌肥 厚，心肌线粒体ROS水平升高(P 0.05)，心肌组织NOX4和p-CaMKII的表达均显著增加(分别为CTRL组的1.4倍和1.6倍，P 0.05)；NAC显著改善了ISO诱导的心肌肥厚，降低了ISO诱导的心肌线粒体ROS过度生成(P 0.05 vs ISO)，有效抑制了ISO 诱发的NOX4及p-CaMKII表达上调(P 0.05 vs ISO)；CTRL+NAC组各项指标与CTRL组大鼠无差异；各组动物尾动脉血压亦 无显著性差异。上述结果提示，氧化应激和CaMKII在βAR持久兴奋诱发心肌肥厚机制中起重要作用，NAC可以通过抑制心 肌细胞线粒体及NADPH氧化酶应激途径降低氧化应激水平，抑制CaMKII激活，从而改善βAR持久激动引起的心肌肥厚。 关键词：氧化应激；钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II；β肾上腺素受体；心肌肥厚 中图分类号：R331.3; Q463 Oxidative stress and calcium/calmodulin-dependent protein kinase II contribute to the development of sustained β adrenergic receptor-stimulated cardiac hyper- trophy in rats LIU Yan-Li, LIU Ben#, QU Yang-Yang#, CHAI Hui-Juan, LI Rui, ZHANG Ling* Department of Physiology and Pathophysiology, Basic Medical School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China Abstract: Sustained activation