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- 2017-04-06 发布于广东
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1.基因工程的概念 2.基因工程的操作工具 (1)“剪刀”与“针线”: (2)运载体: ①作用:将外源基因送入__________。 1.EcoRI限制酶只能识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开,产生黏性末端,请写出切割后产生的黏性末端。 提示:G AATTC CTTAA G 2.不同的限制酶切割形成的黏性末端一定不能连接在一起吗?为什么? 提示:不一定。例如,限制酶1的识别序列和切点分别是GGATCC、在G与G之间切开,限制酶2的识别序列和切点分别是GATC、在G之前切开,两者形成的黏性末端是可以互补配对并连接在一起的。 3.下图表示一段DNA序列,请确定限制酶和DNA连接酶的作用部位。 提示:限制酶和DNA连接酶都是作用于b部位。 1.对基因工程概念的深入理解 (2)运载体具备的条件: ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制——这是保证目的基因能在细胞分裂过程中复制并传递给子细胞的基础。 ②有多个限制酶切点——这是运载体能够接入多种目的基因所必备的条件。 ③有标记基因——这是检测目的基因是否导入受体细胞中的重要判断依据。 [特别提醒] (1)氢键的断裂和重新形成与限制酶和DNA连接酶无关,氢键的形成不需要酶的作用。 (2)DNA连接酶无识别的特异性,能恢复两核苷酸间的磷酸二酯键,将两个DNA片段连接起来。 1.基本操作步骤
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