细胞钙信号转导与疾病细胞调亡和疾病讲述.ppt

钙信号传导与疾病 正常细胞Ca2+信号传导 方法:电生理,Fura-2荧光探针。（Tsein) 拮抗剂，激动剂 细胞内Ca2+库 细胞内主要的Ca2+储存、缓冲、信号传递细胞器为内质网。其他作为钙库的还有线粒体和细胞核。已知IP3作用于非线粒体钙库，内质网则是关键的信号Ca2+库 内质网腔内，钙结合蛋白: 肌细胞肌钙蛋白（calsequestrin）， 其他细胞主要为钙网硬蛋白（calreticulin） 线粒体可通过耗能过程积累Ca2+ ATP的水解驱使H+积聚，通过H -ATPase的反转产生膜电位。 驱动Ca2+积累的能量来自于线粒体膜电位。 干扰电子转运的药物如protonophore解联剂可封闭线粒体摄入Ca2+ 。 细胞内其它钙库 （1）分泌性颗粒在分泌性颗粒中的Ca2+通常被认为是相对无活性的，只是一种结构性Ca2+ 容量。但有些证据显示Ca2+在细胞受到刺激时可以释放出来并参与调控分泌过程。 （2）细胞核：核膜可以储存Ca2+ ，因为核膜是内质网的延续。细胞刺激能够导致Ca2+直接释放到核质，在核质内可能参与调节细胞核的功能。 正常细胞Ca2+信号 胞质Ca2+浓度升高的机制 (一)胞外Ca2+内流 1 Na+/ Ca2+交换:按浓度转运(神经细胞和肌细胞) 2 “漏系统”机制:病理条件下,膜不稳定,漏进细胞的Ca2+增加 3 Ca2+通道: (1)电压依赖性:L,T, N型(突触前)，P(蒲肯野细胞) ,兴奋性细胞，去极化激活，膜片钳，（step模式） （2）配基门通道，非特异性的阳离子通道，NMDA， (3)受体操控性（容量性 Ca2+内流 ） 光敏感通道。 容量性 Ca2+内流 递质（去甲肾上腺素），激活G蛋白，兴奋磷脂酶C（PI-PLC），磷脂酸肌醇 IP3+DG 钙库依赖钙信号 胞内Ca2+ 库的释放导致Ca2+ 库耗竭，激发细胞外Ca2+ 内流，故称为Ca2+库依赖Ca2+内流，是保持细胞内Ca2+ 水平的基础 1） Ca2+ 内流有细胞内Ca2+库释放激活；2）细胞受到持续刺激， Ca2+库耗竭，则Ca2+内流持续活化；3）静息状态下， Ca2+库充盈；4）当Ca2+ 库充盈完毕，则Ca2+ 内流失活。以上结果表明：细胞内Ca2+库的充盈状态调节着质膜上的Ca2+ 内流通路的活性状态。 钙库激活：IP3受体，Ryanodine受体， 但近来的观点认为，PLC相关刺激调节的Ca2+内流并不是质膜上的IP3作用直接引起的，而是由IP3引起的细胞内钙库释放的结果。 Tg和环盐酸吗甲吡嗪酸(cyclopiazonic acid, CPA)等的发现直接证实了这一结论。这两个药均可激活IP3敏感钙库Ca2+的储存所必需的ATPase的活性，从而使得钙库释放耗竭。实验显示，当应用这些试剂处理细胞时，跨质膜Ca2+内流被激活。 细胞内钙库耗竭可能存在两种机制与质膜相联系。 （1）IP3受体与细胞骨架相连，这种相联系使得IP3受体固定于细胞膜上。细胞内钙库的耗竭使IP3受体构象发生改变，再通过细胞骨架或其他蛋白-蛋白相互作用，将IP3受体转运到细胞膜上。 （2）钙内流因子（calcium influx factor,CIF）：细胞内钙库耗竭释放出信号分子作用在质膜上的Ca2+ 通道上。 这一信号分子可能是cGMP、细胞色素P450代谢物，但两种机制都有一些疑点。 近来研究表明可能一些囊泡转运参与其中，囊泡预先形成，通过囊泡融合活化的钙通道插入质膜。 TRP通道是一类六次跨膜的非选择性阳离子通道。它们在进化中高度保守，在哺乳动物体内广泛表达，参与了许多重要的生理学功能，如对温度、痛觉、听觉的感知以及受精 。 感光受体突变体 选择性的Ca2+ 通道 Ca2+池耗竭而激活 钙的信号传导在发病学中的作用 细胞凋亡（Kuiser和Edelman） 糖皮质激素引起胸腺细胞的调亡 上游：细胞外，内质网，线粒体内钙的释放， 激活蛋白水解酶，磷酸脂酶，蛋白激酶 Ca 2+ /Mg 2+依赖低分子核酸内切酶NUC18， Ca 2+ 依赖内核酶DNaseI， 缺血、缺氧损伤与Ca2+信号传导 心肌缺血性损伤，阻断Ca2+通道，动物试验能改善缺血症状，但人的试验并不能阻止心梗的发生。 ATP合成障碍，Na +泵功能下降， Na +/H+交换，细胞内Na +增加， Na +/ Ca2+交换， 胞内Ca2+增加。 内质网Ca2+泵功能障碍 细胞膜Ca2+泵功能障碍 脑缺血 缺血中心区 半影区 兴奋毒作用/谷氨酸 局部脑缺血20min～2h，缺血脑区灌流液中谷氨酸的量升高2.5～20倍 NMDA受体，AMDA和KA(kainic acid) 受体