第八章 糖和苷-2.pptVIP

8.5.1 一般检识方法（通用方法） 8.5.1.1 显色反应 8.5.1.2 纯度鉴定　 8.5.1.3 分子量测定 　 8.5.２ 特征检识方法 8.5.２.1 还原糖 检识 8.5.２.2 非还原糖 检识 （包括苷） 8.5.２.3 单糖 与 结合糖 区别 检识 8.5.２.4 其它专属性检查 8.5.1 一般检识方法（通用方法） 8.5.1.1 显色反应 8.5.1.2 纯度鉴定　 8.5.1.3 分子量测定 　 8.5.２.2 非还原糖检识（包括苷） Fehling试验之反应液 过滤 滤液 加酸，Δ 水解 观察 放冷 有 沉淀或絮状物 无 沉淀或絮状物 过滤 沉淀 滤液 Fehling试验 观察是否阳性 ---- Fehling反应 + 酸水解法： １．方法与现象 Fehling试验 ２．结果判断： 原理： 苷 水解 苷元 一般难溶于水， 有沉淀 结合糖 水解 单糖 水溶性好， 无沉淀 (1) 观察水解液放冷后有无沉淀 --- 可区别苷与糖 如有 沉淀或絮状物产生， 可能含苷 如无 沉淀或絮状物产生，一般不含苷 (2) 如果水解前 Fehling试验阴性， 水解后 Fehling试验阳性， 则可能 含有非还原糖（包括苷） 8.5.２.3 单糖与结合糖区别检识 样品酸水解后，层析斑点增多： 为（ ） 糖 结合 层析斑点不变 为（ ） 糖 单 ---- 酸水解 + 平面层析法： Rf 8.5.２.4 其它专属性检查 对上述水解所得沉淀、滤液，以及原提取液， 还可酌情进行下述试验： １．糖类定性试验 参见上述 8.5.1.2 纯度鉴定 （多用层析法：ＰＣ、ＴＬＣ等） NP.92 （１）单糖的种类 （标准品对照） （２）结合糖的组成及各单糖的比例 （标准品对照） （３）必要时，可另测定单糖之间的连接位置, 及糖链内的连接顺序 可鉴别 检识方法 试剂或 操 作 等 现象 糖和苷 还原糖 非还原糖 苷 Fehling 反应 Fehling试剂： ?CuSO4与酒石酸钾钠的碱溶液混合 紫红色或 其它颜色 阳性: 砖红色Cu2O 沉淀 1. 酸水解前: 阴性 . ………后: 滤液 呈 阳性 2. 水解液放冷后无: . 沉淀或絮状物 1. 同上 2. 水解液放冷后有: . 沉淀或絮状物 Molish 反应 脱 水 反 应 （糠醛形成反应） α－萘酚 浓H2SO4 W D 结 束 活性炭须做预处理，除金属离子 方法 P.113 ： NP. 100 P.114： @ 糖 亲水 中性 ? ? 不解离 可解离 多 为 中、高 分子量 苷 亲水 中性 杂 质 亲脂 亲水 ? 可 解 离 电解质 酸碱盐 成分 亲水/亲脂 酸碱性 解离度 分子量 亲水 中性 酸性 酸性 碱性 中性 极 性 大 极 性 较 大 不 解 离 小分子 或 大分子 分离方法 分离目的 分离方法 洗脱顺序 及 原理 除 无机盐 离子交换 法 活性碳 层析 凝 胶 层析 后下 先下 后下 被 交换 吸附 分子量小 吸附弱 进入凝胶 内部 ( 可解离 小分子 ） 糖 亲水 中性 ? ? 不解离 可解离 多 为 中、高 分子量 苷 亲水 中性 杂 质 亲脂 亲水 ? 可 解 离 电解质 酸碱盐 成分 亲水/亲脂 酸碱性 解离度 分子量 亲水 中性 酸性 酸性 碱性 中性 极 性 大 极 性 较 大 不 解 离 小分子 或 大分子 分离方法 分子量大的杂质 下 分子量小的杂质 下 醇 沉 蛋白 沉淀剂 透析法 凝胶法 活性炭 沉淀多糖、蛋白质 精制 单糖 低聚糖和苷 用于精制 多糖