各种材料全基因组提取试剂盒TAKARA.pdfVIP

研究用 Code No. 9765 说明书 TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 v201306Da 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 制品内容 1 ● 保存与运输 1 ● 实验前的准备 1 ● 操作方法 2 ● 实验例 3 ● 洗脱体积对 DNA 提取量和浓度的影响 5 ● 洗脱次数对 DNA 提取量的影响 5 ● 注意事项 6 ● 不同材料的 DNA 提取量 6 ● 实验材料最大起始量 7 ● QA 7 ● 制品说明 本试剂盒是用于提取血液、革兰氏阴性细菌、培养细胞及植物组织（植物幼嫩的叶、茎、根等）、动物组 织（Blood/Gram-negative Bacteria/Cultured Cells/Plant Tissue/Animal Tissue）等基因组 DNA 的广谱型 小量纯化试剂盒。试剂盒采用了独特的细胞裂解系统，由细胞裂解液裂解细胞释放基因组 DNA，再结合 DNA 制备膜技术纯化基因组 DNA。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点，组织细胞裂解后，提取操作 仅需 20 分钟便可完成。使用本试剂盒可从 50～100 μl 的哺乳动物全血（含抗凝剂）、1～10 μl 的有核红 细胞全血（含抗凝剂）、1.0～5.0E+09 的革兰氏阴性细菌、1.0E+05～1.0E+07 的培养细胞、2～25 mg 的动物组织、10~25 mg 深加工品或 25～100 mg 幼嫩植物组织中纯化得到多至数十微克的高纯度基因组 DNA，提取得到的基因组 DNA 可用于 PCR 反应、Southern 杂交以及 RAPD、AFLP、RFLP 等多种分子 生物学实验。 ● 制品内容（50 次量） 本试剂盒分试剂 Part I 与 Part II 两部分。 ■ Part I -20℃保存 Proteinase K（20 mg/ml） 1 ml RNase A（10 mg/ml） 0.5 ml Part II 室温（15-25℃）保存 Buffer GL*1 12 ml Buffer GB*1 12 ml Buffer WA*1 28 ml Buffer WB*2 24 ml Elution Buffer 14 ml Spin Columns 50 支 Collection tubes 50 支 1 含有强变性剂，应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时，请立即到医院进行 处理。 *2 首次使用前，请添加 56 ml 的 100%乙醇，混合均匀。 【试剂盒之外所需准备试剂】 ◆ 无水乙醇 ◆ 灭菌水 ◆ PBS 溶液 ● 保存与运输 1. 本试剂盒分两部分保存，Part I 请保存在-20℃；Part II 于室温下（15-25℃）保存。 2. 本试剂盒分两部分运输，Part I 请在-20℃条件下运输；Part II 于室温下（15-25℃）运输。 ● 实验前的准备 1. 准备 56℃水浴。 2. Buffer GL 若出现沉淀，请于 65℃加热溶解，待恢复至室温后使用。 3. Buffer WB 在首次使用前，请添加 56 ml 的 100%乙醇，混合均匀。 4. 洗脱结合于 DNA 制备膜上的基因组 DNA 时，将 Elution Buffer 或灭菌蒸馏水加热至 65℃使用将会提高 基因组 DNA 的洗脱效率。 -1- ● 操作方法 操作流程见图 1，细胞或组织裂解后全套操作约需 20 分钟（如 果组织需要裂解，则所需时间因组织不同而不同），分为组织或 细胞裂解、DNA 与膜结合、DNA 纯化等步骤，详细说明如下： 1. 组织或细胞的裂解： 使用不同的实验材料需采用不同的裂解步骤，具体说明如下： ◆ 动、植物组织，深加工品的裂解： ① 取 2～25 mg 的动物组织、深加工品或 25～100 mg 植物组 织（切勿使用超过最大起始量的组织），置于 2 ml tube 中， 用剪刀尽可能地剪成碎块，对于一些质地坚硬的组织也可以 进行液氮研磨。 ② 加入 180 μl 的 Buffer GL、20 μl 的 Proteinas