暨南大学色08第二次.doc

2008/9级《色谱分析》第二次作业 一、选择题 1．衡量色谱柱柱效性能的指标是（ C ） A．分离度 B．容量因子 C．塔板数 D．分配系数 2．在液相色谱中，范氏方程中的哪一项对色谱柱效能的影响可以忽略不计？（ B ） A．涡流扩散项 B．分子扩散项 C．流动区域的流动项传质阻抗 D．停滞区域的流动项传质阻抗 3．在正相色谱法中，如增加流动相极性，则（ Ａ ） A．样品的k降低，tR降低 B．k增加，tR增加 C．相邻组分的α增加 D．对α基本无影响 4．用色谱法进行定量分析中，要求混合物每一个组分都出峰的是（ Ａ ） A．归一化法 B．外标法 C． 内标法 D．内加法 5．对于正相液相色谱法，不能用作流动相的溶剂是（ Ｄ ） A．氯仿 B．乙醚 C．正已烷 D．水 6．内标法定量的优点是（ Ｂ ） A．不需要校正因子 B．对进样量要求不严格 C．样品配制简单 D．内标物易得 7．液相色谱中通用型检测器是（ Ｃ ） A．紫外吸收检测器 B．荧光检测器 C．示差折光检测器 D．热导池检测器 8．以HPLC法测定复方药物中的微量成分，宜采用的定量方法是（ Ｂ ） A．归一化法 B．内标法 C．外标工作曲线法 D．外标一点法 9．采用ODS柱分析有机弱碱混合物样品，当以某比例的乙腈-水为流动相时，样品的容量因子较小，若想使容量因子适当增加，应如何调整流动相的组成？ （ Ｄ ） A．增加流动相中乙腈的比例 B．减小流动相中水的比例 C．在流动相中加入少量醋酸 D．在流动相中加入少量氨水 二、问答题 1．Martin 和 Synge 在二十世纪四十年代所提出的色谱领域两个远见有何重要意义？ 答：他们的伟大之处在于提出的两个远见： （１） 流动相可以用气体代替液体以获得更高效分离 （２） 在液相色谱中，使用小粒径填料以及高压传输可以获得最小的理论塔板高度Ｈ。 第一个远见导致了气相色谱法的诞生，第二个远见则促进了高效液相色谱的诞生。 2．高效液相色谱与气相色谱在流动相上有何差别？ 答：ＧＣ：流动相为惰性气体，组分与流动相无亲和力。 　　ＨＰＬＣ：流动相为液体，流动相与组分间具亲和力，这为提高柱选择性、改善分离增加了因素，且流动相种类较多，选择余地广；流动相极性和ｐＨ值选择对分离起重要作用，选不同比例两种以上液体作为流动相可以增大选择性。 3．HPLC与GC中影响分离R的因素有何不同？ 答：ＧＣ：柱选择项主要受固定相影响（分离关键） 　　　　　柱容量项主要受柱温影响。 　　ＨＰＬＣ：柱选择项主要受流动相性质影响（分离关键） 　　　　　　　分离相种类确定后，柱容量项主要受流动相配比（洗脱能力）的影响 4．写出色谱分离方程，结合该方程谈谈如何提高高效液相色谱的分离度？ 答：　 　，ｎ：采用粒度小、填充均匀的固定相 　　　　　　　　　　采用粘度小、低流速的流动相 　，：调整流动相种类、极性和ｐＨ值（受柱温度影响小） 　，ｋ：调整流动相和固定相配比（受柱温影响小） 5．试解释下列名词： ODS柱；化学键合相；封尾键合相；键合相色谱；检测限；溶剂梯度洗脱 答： ODS柱：十八烷基硅烷载体表面的硅醇基键合，构成十八烷基硅烷键合光相。 化学键合相：通过化学反应将固定液的官能团键合在载体表面而构成的固定相。 封尾键合相：用化学反应的方式将键合相的载体表面残余的硅醇基除去，这种键合相称封尾键合相。 键合相色谱：以化学键合相为固定相的液相色谱分析法。 最重要、应用最广泛的高效液相色谱法，目前已经完全取代了液液分配色谱法，与液液分配色谱相比，ｋ的影响因素相似。 检测限：又叫敏感度，是响应值恰为２倍噪音时所需要的样品。敏感度同时考虑了检测器的噪音和灵敏度，是仪器整体性能的综合量度。 溶剂梯度洗脱：流动相的溶剂强度变化的洗脱方式；流动相的溶剂强度和组成变化影响组分的保留和选择性。 6．封尾键合相具有什么特点？键合相进行封尾处理的目的是什么？ 答：封尾键合相具有的特点：仅有分配作用，无吸附作用 　　　　　　　　　　　　　稳定性好，并具有强疏水性。 键合相进行封尾处理的目的是：防止残余硅羟基对极性物质产生过分吸附而改变键合相分离性能，键合反应后用小分子烷化剂进行封尾处理以消除残余硅羟基，提高键合相稳定性和色谱分离重复性。 7．采用HPLC对一组邻苯二甲酸酯类化合物进行分析，采用流动相为四氢呋喃:异辛烷 ( 5%:95%, V/V ) ，得到色谱图如下： 试回