第一章 植物组织培的基础论与基本知识第一章 植物组织培的基础理论与基本知识.docVIP

第一章 植物组织培养的基础理论与基本知识 目的要求： ?(1) 掌握组织培养的概念和类型； ?(2) 掌握组织培养的特点； ?(3) 了解组织培养发展史； ?(4) 初步掌握组织培养在农业实践上的应用。 第一节 植物组织培养的基本概念及类型 一、植物组织培养的概念 植物组织培养（tissue culture）指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果、茎尖等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）、细胞（如大孢子、小孢子及体细胞）以及原生质体，培养在人工控制的环境里使其再生形成完整的植株。亦可称为无菌培养、离体培养、试管培养。 根据培养基的形态可分为固体培养和液体培养；液体培养又可分为悬浮培养、振荡培养、旋转培养等。 外植体（explant）：在植物组织培养过程中，有植物体上切取的根、茎、叶、花、果实、种子等器官以及各种组织和细胞统称为外植体。 愈伤组织：植物局部创伤后或在组织培养中，当已分化的细胞恢复了细胞分裂能力，而增殖形成的 无组织结构、无器官分化的薄壁细胞团。 在组织培养中，先由外植体增殖产生，在一定条件下，对它经过一段时间培养，可能从其再分 化出具一定结构及功能的器官，如根、茎、胚状体或重新形成完整的植株。 二、植物组织培养的类型 1.植物培养 植物培养是指幼小植株的培养。 例如兰花，兰花及兰科植物种子的发育特殊，种子成熟之后没有胚乳，需要与某些真菌共生，由真菌提供营养才能萌发，在自然条件下，萌发率很低。早期通过人工接种真菌可使兰花种子萌发，但技术繁琐，难度较大，后来发现在人工培养基上，只要营养成分合适不需要真菌共生，兰花种子也能萌发。以蝴蝶兰为例，由一个好的荚果播种后两个月左右可产生数万个小圆球茎，经过一个月分瓶后，就可以进行育苗，大约3个月后即可得到大量可移栽的试管苗。无菌播种已是各个大型蝴蝶兰生产企业主要的种苗繁育技术。 2.器官培养 将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养，也称为植物离体培养。例如马铃薯、兰花、丽格海棠。 3.离体胚培养 将分化过程中成熟或未成熟的胚取出进行培养。 4.细胞培养 将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而其细胞脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。它是最为常见的。 5.原生质体培养 原生质体培养是指将植物细胞的细胞壁通过机械、物理或化学的方法去除，然后再进行培养。 70年代以后有关植物原生质体培养和体细胞杂交的研究得到了很诀发展，如烟草、曼陀罗、颠茄、胡萝卜、油菜等能从其原生质体经培养再生分化长成胚或完整的植物，利用原生质体融合已经能使烟草属和矮牵牛属的杂种细胞增殖分化成杂种植株。 6.基因转化 植物基因工程是指利用重组DNA、细胞组织培养等技术，将外源基因导入植物细胞或组织，使遗传物质定向重组，从而改良植物性状，培育优质高产的植物新品种。 自1983年世界第一株转基因烟草诞生至今，二十多年的植物基因转化实践证明，外源基因可以通过不同的转化方法进入植物基因组进而整合并表达，迄今获得成功转化的植物已超过120种。随着转基因技术在作物品种改良、抗病虫害育种和植物医药工程等领域的广泛应用。 第二节 植物组织培养的生理依据 一、植物细胞全能性 细胞全能性(cell totipotency)：植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。 1.细胞全能性的认识过程 1902年，德国植物学家Haberlandt在自然界再生作用的启迪下，提出假说。 1958年，由Steward等人证明：胡萝卜细胞（一小块愈伤组织）在适宜的条件下（液体悬浮培养）下会形成体细胞胚（胚状体），其发育阶段与合子胚相似，最后形成小植株。此后又证实了胡萝卜单一的细胞（不必依赖于其他细胞的参与）亦具有这种能力。 Mature plant → Root cells culture → Cultured cells → Cells in culture divide to form embryoid bodies →Torpedo stage → Cotyledonary stage is planted → Plantlet forms roots → Mature plant 2.植物细胞全能性的概念： 植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下如同受精卵一样，具有发育成完整植物体的潜在能力。 两个含义： 1）植物细胞无论是体细胞还是生殖细胞，均具有该物种全部的遗传信息。 2）每个植物细胞均具有发育成完整植物体的潜在能力。 ? 为什么植物细胞具有“全能性”，而动物细胞不表现“全能性”呢 可能与动物、植物在营养需要、代谢类型和发育方式上的不同有着