iTRAQ定量蛋白质组学试卷.ppt

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2017-04-19 发布于湖北
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iTRAQ定量蛋白质组学;主要内容;iTRAQ技术简介;*;*;※首选2-3次生物重复，最好3次或以上 ?组内样品个体差异大的材料需要更多的生物重复 ?生物学重复样品较多时，可以适当混合以减少样品数目 ?无任何重复，可以结合其他技术进行验证 ;iTRAQ试剂标记原理;图1 iTRAQ技术原理图;iTRAQ技术优势;iTRAQ实验流程;iTRAQ实验结果示例;案例1：人脑脊液（客户文章未发表，资料仅供内部参考）;结果;;数据分析;数据分析;数据分析;数据分析;案例2。蜂王浆提取物对肿瘤细胞的影响;数据分析;客户关注的信号通路（pathway）;;; 差异表达蛋白相互作用网络分析;总结;高阶（客制化）信息分析;iTRAQ详细实验步骤—ABI试剂盒;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤; B%从5分钟5%到40分钟上升至25% Time(min) B% 0 0 5 5 40 25 45 80 50 80 51 0 60 stop 根据峰型和时间共收取20个梯度,真空离心浓缩后，用50μL RPLC A相[5%ACN,0.1%甲酸(TEDIA,Fairfield,USA)]溶解，进行第二维分析。 ;iTRAQ详细实验步骤; Time(min) B% 5 5% 90 35% 95 80% 100 80% 105 5% 120 stop 质谱鉴定：MS扫描范围400-1800 MS/MS扫描范围100-2000 IDA 采集模式一个图谱选择四个最强的母离子进行串级扫描。 ;iTRAQ详细实验步骤;THANKS!