5.3 血红蛋白的提取和分离 同步测试2 人教版选修1.docVIP

5.3　血红蛋白的提取和分离 1.利用凝胶色谱法先洗脱出来的蛋白质是 (　　)。 A．相对分子质量大的 B．溶解度高的 C．相对分子质量小的 D．所带电荷多的 解析　相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，首先洗脱出来。 答案　A 2．将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是 (　　)。 A．血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层 B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层 C．脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层 D．甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层 解析　混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第1层为无色透明的甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第3层为红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液；第4层为暗红色沉淀物，主要是红细胞破碎物沉淀。 答案　D 3．下列各项中不属于电泳使样品中各分子分离的原因的是 (　　)。 A．分子带电性质的差异 B．分子的大小 C．分子的形状 D．分子的变性温度 解析　电泳是指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程，样品分子的带电性质不同、分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度，与分子的变性温度无关，故选D项。 答案　D 4．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是 (　　)。 A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液 B．通过透析可以去除样品中相对分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取 C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化 D．可通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度 解析　首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除相对分子质量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定，由此可知B的叙述错误。由玻璃纸制成的透析???能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析可以去除样品中相对分子质量较小的杂质。 答案　B 5．下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(图I)和洗脱(图Ⅱ)示意图，请据图回答下列问题。 (1)在加样示意图中，正确的加样顺序是_____________________________。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①_________________________、 ②贴着管壁加样、③________________________________________。 (3)等样品______________________时，才加入缓冲液，待__________________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每 ________mL收集一管，连续收集。 解析　加样品时应严格按要求进行操作，吸管应贴着管壁，管口沿着管壁环绕移动，还应注意不要破坏凝胶面。等样品完全进入到凝胶层时，才加入缓冲液进行洗脱。 答案　(1)④→①→②→③ (2)不要破坏凝胶面　使吸管管口沿管壁环绕移动 (3)完全进入凝胶层　红色的蛋白质　5 课堂小结