容量调控氯通道基因siRNA表达载体的构建及其沉寂效应检测.pdfVIP

- 研究原著- 文章编号! 1000 Z790 Z005 09 0769 04 容量调控氯通道基因 si RNA 表达载体的构建及其沉寂效应检测 张 勇1 !贾林涛1 !李庆霞1 !王 成 济1 !周 士 胜3 !杨 安 钢1 !Z 第 四 军 医 大 学 基 础 部:1 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 教 研 室 Z 免疫学教研室 陕西 西安 710033 3 大连大学医学院医学研究中心 辽宁 大连 1166ZZ 三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三 收稿日期! Z004 1Z 08 修回日期! Z005 01 13 基金项目!国家 973 计划资助 Z004CB518805 ;国家高科技研究与发 展计划 863 资助 Z004 AAZ17071 ; 国家自然科学基金 30Z7060Z 通讯作者!杨安钢 .Tel . 0Z9 833745Z8 Email .a gy an g＠ f mmu .edu .cn ; 周士胜 . Email .ssZhou ＠ f mmu .edu .cn 作者简介!张 勇 1978 男 汉 族 河 南 省 滑 县 人 . 硕 士 生 导 师 杨 安钢 周 士 胜 . Tel . 0Z9 Ext .14 Email .fi ndersZ001 ＠ si na .com Vector constructi on and silenci n g effect of vol u me-re g ul ated chlori de channel g ene-t ar g eted small i nterferi n g RNA Z ~ANG Yon g 1 J I A Lin- Tao 1 LI Gin g - Xia 1 WANG Chen g - Ji 1 Z ~OUshi-shen g 3 YANG An-Gan g 1 Z 1 De p art ment of Bi oche mistr y and Molecular Bi ol o gy Z De p art ment of I mmunol o gy School of Basi c Medici ne Fourt h Militar y Medical Uni versit y Xi an 710033 Chi na 3 Instit ute of Basi c Medical Sci ences Medical Coll a g e Dali an Uni versit y Dali an 1166ZZ Chi na [ Abstract ) AI M : TO 9 ener at e vOl u me r e 9 ul at ed chl Or i de chan nel CLC3 9 ene s P eci f i c smal l i nt erf er i n 9 RNA si RNA and i t s ex P r essi On vect Or . METHODS : CLC3 mRNA t ar 9 et ed hai r P i n si RNAs Wer e devi sed and t he Ol i 9 Onucl eOti de str ands Of DNA f r a 9 ment s encOdi n 9 t he abOve si RNAs Wer e s y nt hesi Zed . Aft er anneal i n 9 Of t he cOm P l ement ar y str ands t he DNA f r a 9 ment s Wer e cl Oned i nt O a P SUPER P l asmi d f Ol l OWed b y am P l i f i cati On i n E . col i and DNA se C uenci n 9 . The r esul ti n 9 P SUPER cOn str uct s Wer e t hen i nt r Oduced i nt O hu man st Omach car ci nOma SGC7901 cel l s and t he ex P r essi On Of CLC3 9 ene Was exami ned b y RT PCR and i ndi r ect i mmunOfl uOr escence . RESULTS : The DNA f r a 9 me