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第二十一章 色谱-质谱联用仪 一、概述 generalization 二、LC-MS联用仪 hyphenated technology of LC-MS 一、概述 generalization 二、接口装置与离子化方式 2. 大气压化学电离（ APCI ）——适用于具有一定挥发性的中等极性与弱极性，相对分子量在2000以下的小分子化合物 大气压化学电离（ APCI ） 三、质量分析器 四级杆质谱仪 飞行时间质谱仪 离子阱质谱仪 扇形磁场质谱仪 傅立叶变换质谱仪 串联质谱法和多级质谱法 2.四级杆质量分析器 3. 飞行时间质量分析器 4.离子阱质量分析器 四、注意事项 非挥发性盐（硫酸盐、磷酸盐等）与LC/MS不匹配。可以用醋酸氨等代替。当流动相中有挥发性的酸、碱时，要保持pH值始终相同。 五、仪器的基本功能 1. 离子化方式（ESI、APCI） 正离子模式（如碱性物质，M+H, M+Na） 负离子模式（如酸性物质，M-H） 2. 碰撞诱导裂解（CID） ESI APCI 主要为准分子离子，而碎片离子很少（甚至没有）。 通过碰撞使样品离子的内能增加，裂解形成碎片离子的过称，叫做CID。 形成前体离子（母离子）、产物离子（子离子）。 3. 扫描类型 全扫描（full scan）：提供样品中每一个分析物的全部质谱。质量分析器在给定的时间内无间断地从第一个m/z扫描到最后一个m/z。 选择离子监测（SIM）：对一个或一组特定离子进行检测的技术。 多重反应监测（MRM）：分别选定前体离子和产物离子进行检测的技术。 4. 扫描方式 产物离子扫描 前体离子扫描 中性丢失扫描 产物离子扫描 MS1 选择了某一特定质量的母离子，碰撞池产生碎片离子，然后在MS2 中分析。此过程产生典型的质谱/质谱碎片谱图。 母离子扫描 在母离子扫描中，MS1 测定母离子，MS2 测定某个特定的碎片离子，因此可在非常复杂的混合物中监测某种特定的分子。 中性丢失扫描 MRM 六、色谱－质谱提供的信息 （一）总离子流色谱图 （二）质量色谱图 （三）全扫描色谱－质谱三维谱 （四）质谱 * * 质谱：纯物质结构分析 色谱：化合物分离 色谱-质谱联用：共同优点 GC-MS；LC-MS；CZE-MS （毛细管电泳-质谱） 困难点： 载气(或流动液)的分离； 出峰时间监测； 仪器小型化； 关键点：接口技术(分子分离器) 进 样 色谱仪 接口 质谱仪 计算机系统 分析结果 大气压电离技术（API） 1.电喷雾电离（ Electrospray ionization, ESI） Rayleigh Limit Reached + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + - - + + + + + + - - Evaporation + + Charged Droplets 试样离子 准分子离子 + + + + + + + + - - 其他离子 离子化过程： 带电液滴的形成 溶剂蒸发与液滴破碎 离子蒸发形成气态离子 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Chromatograph Mass Spectrometer Separation Identification B A C D A D B C MS 电喷雾电离——适用于强极性、热不稳定化合物和高分子化合物 流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘； 气帘的作用：雾化；蒸发溶剂；阻止中性溶剂分子 Dielectric capillary High wattage heater HPLC inlet Corona discharge needle Vaporizer Nebulizer gas + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 1.扇形磁场质谱仪 1.扇形磁场质谱仪 色谱-四极杆质谱仪结构示意图 3. 飞行时间质量分析器 特定m/z离子在阱内一定轨道上稳定旋转，改变环电极射频电压，不同m/z离子飞出阱到达检测器； 5. 傅里叶变换分析器