基因的分子生物学答案.pptVIP

基因的分子生物学;§21·1 遗传物质及其结构; 当时人们猜测，构成遗传物质的应该是蛋白质，理由： ? 构成蛋白质的氨基酸有 20 种，氨基酸的不同组合，就能形成多种不同的蛋白质 ? 蛋白质在生物体内作为酶，催化生物的代谢反应，并由此控制多种遗传性状的表现 后来，在对细菌、病毒这些及其简单的生命形式的研究过程中，科学工作者们才开始发现遗传物质的蛛丝马迹。;1、著名的肺炎球菌实验 1928 年，英国的细菌学家 Griffith 首次发现了基因是一类特殊生物分子的证据 他的实验对象是两种肺炎球菌： ;实验结果说明： ? 被加热杀死的 S 型肺炎球菌无致病性； ? 被加热杀死的 S 型肺炎球菌中 一定有某种特殊的生物分子或遗传物质，能够使无害的 R 型肺炎球菌转化成为高致病性的 S 型肺炎球菌； ? 被转化成 S 型肺???球菌的后代仍保持为 S 型，可见该肺炎球菌的遗传特性被改变。 ; 在美国纽约洛克菲洛研究所工作的 Avery 立刻敏感地抓住这一问题，进一步进行研究： ? 他将被加热杀死的 S 型肺炎球菌的各个生物化学成分分离，包括多糖、蛋白质、脂肪、核酸。 ? 再将各个组分分别加入活的 R 型肺炎球菌中，研究其致病性和性状的变化。 结果发现，只有核酸能使 R 型肺炎球菌转化成为S型。 ? 进一步的酶解实验也证明：蛋白质水解与否与转化无关，而核酸水解与否可以控制转化的成败。 1944年，Avery 等人正式得出结论 —— DNA 是生命的遗传物质，蛋白质不是生命的遗传物质。;2、更有说服力的噬菌体实验 1952 年，Hershey Chase 利用噬菌体(细菌病毒，其结构十分简单，由 DNA 内核和蛋白质外壳构成)为实验对象完成的实验 分别用放射性同位素 35S 标记病毒的蛋白质外壳、32P标记病毒的 DNA 内核，分别感染未被标记的细菌 关键： 控制好感染时间，保证噬菌体恰好可以完成感染作用，然后在组织搅拌机中搅拌，切断噬菌体外壳与细菌细胞间的联系。 ;上清：游离的噬菌体;实验结果： ? 噬菌体在感染细菌时，仅仅是其中的 DNA 内核进入细菌，而蛋白质外壳留在细菌细胞外 ? 从细菌中释放的新噬菌体颗粒中，能检测出 32P 标记，而检测不出 35S 标记 可见噬菌体在繁殖的过程中，DNA 得到了复制，并且控制新的蛋白质外壳的合成 从 1944 年到 1952 年，整整 8 年的时间，全世界的科学家才接受了 Avery 的结论 —— 生命的遗传物质是 DNA。 ;二、DNA的结构 1953年2月28日，Watson Crick 确立了DNA双螺旋模型(double helix model) DNA 双螺旋链的特征： 1、两条通过碱基配对连接的多核苷酸长链，称为“互补链”(complementary chain)，互补链以反向平行 的方式围绕同一中心轴相互缠绕，组成双螺旋 两条链均为右手螺旋，每一螺距为 3.4nm，而相邻碱基对(base pair, bp)之间的距离为 0.34nm，因此每一螺旋中有 10 个 bp。;2、碱基的互补配对是固定的准确的，A与T 之间形成两条氢键，而 G 与 C之间形成三条氢键，可见G与C的连接比A与T 之间的连接更稳定。 3、DNA 分子是有方向性的，由于脱氧核糖核磷酸通过 5`,3`-磷酸二酯键 连接形成多核苷酸长链，长链的 ;4、双螺旋的表面形成两条沟，其中 ? 大沟(wide groove)宽 2.2 nm，是蛋白质的结合位点； ? 小沟(narrow groove)宽 1.2 nm 5、DNA 分子中，4 种核苷酸的排列顺序不受任何限制，能构成极其繁多的组合形式 如一段长 100 bp 的 DNA片段，其核苷酸的排列方式有 4100 种 DNA 分子蕴藏着无穷多的遗传信息;§21·2 DNA的复制;二、DNA的半保留复制 ; 结果： 亲本的 DNA 离心后形成一条带，分布在离心管的下部，可见是仅含 15N 的双链 第一代的 DNA 离心后形成一条带，正好分布在离心管的中部，可见是同时含 15N 和 14N 的双链 第二代的 DNA 离心后形成两条带，一条位于离心管的中部，一