分子生物学-张晓东-表观遗传学和磷酸化-2013.pptVIP

表观遗传学Epigenetics 蛋白质磷酸化;;;;;;DNA甲基化与基因表达;DNA甲基化; 真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性： 一种被称为日常型（mainte-nance）甲基转移酶，另一种是 从头合成（denovo synthesis）甲基转移酶。前者主要在甲基化母链（模板链）指导下使处于半甲基化的DNA双链分子上与甲基胞嘧啶相对应的胞嘧啶甲基化。日常型甲基转移酶常常与DNA内切酶活性相耦联，有3种类型: II类酶活性包括内切酶和甲基化酶两种成分，而I类和III类都是双功能酶，既能将半甲基化DNA甲基化，又能降解外源无甲基化DNA。 ;;;;;;;HBXIP upregulates s100a4 via stat4 and pten to promote growth and migration of breast cancer cells;迄今已发现的印迹基因已有150余个，大多成簇排列，其中许多是疾病基因。虽多数印迹基因的作用机制尚不清楚，然而几乎都与DNA甲基化型的异常相关联。 ;;;涉及到不同亲本来源的印迹基因的DNA甲基化型都是在生殖细胞成熟过程中建立的。 ;组蛋白修饰;;;;;非编码RNA调节;;;基因表达的重新编程;;;;;蛋白质磷酸化与非磷酸化;根据是否有调节物来分又可分成两大类：? 信使依赖性蛋白质激酶（messenger-dependent protein kinase），包括胞内第二信使或调节因子依赖性蛋白激酶及激素（生长因子）依赖性激酶两个亚类；非信使依赖型蛋白激酶。 ;;蛋白激酶的催化作用： 　使调节酶磷酸化 (1)磷酸化酶激酶—P—激活 (2)糖原合成酶—P—失活 使许多蛋白质磷酸化 (1)核中组蛋白磷酸化—加速核酸的复制，转录。 　 (2)核糖体蛋白质磷酸化—加速蛋白质合成通性。 　 (3)使膜蛋白磷酸化—加速物质的转运。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 (1). 在胞内介导胞外信号时具有专一应答特点。与信号传递有关的蛋白激酶类主要受控于 胞内信使，如cAMP，Ca2+，DG（二酰甘油，diacyl glycerol）等，这种共价修饰调节方式显然比变构调节较少受胞内代谢产物的影响。 (2).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化控制了细胞内已有的酶活性。与酶的重新合成及分解相比，这种方式能对外界刺激做出更迅速的反应。(3).对外界信号具有级联放大作用；(4).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化保证了细胞对外界信号的持续反应。 被磷酸化的主要氨基酸残基：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。组氨酸和赖氨酸残基也可能被磷酸化。;1、Ser/Thr蛋白激酶 蛋白磷酸化是蛋白激酶将磷酸基因转移到特定底物蛋白上的共价修饰过程，调控蛋白质的酶学活性或生物学功能，分为: ①cAMP依赖的PK ②Ca2+/磷脂依赖的PK ③ Ca2+/ （CaM）钙调蛋白依赖的PK ④cGMP依赖的PK ⑤近年发现新成员——DNA依赖的PK ⑴cAMP依赖的蛋白激酶（ cAMP dependent protein kinase.PKA） cAMP-依赖蛋白激酶是一种四聚蛋白酶，含有两个调控亚基和两个催化亚基。当cAMP-依赖蛋白激酶的调控亚基结合时，激酶解离成两个具有催化活性的蛋白激酶（由催化亚基形成）和一个二聚的调控亚基。  cAMP-依赖蛋白激酶被活化后，它解离出来的活性蛋白酶能够催化ATP分子与目标代谢酶分子的磷酸化反应。一般是代谢酶的Ser或Thr残基的羟基被ATP磷酸化，其结果是代谢酶被抑制或激活。cAMP即是通过上述机制实现对代谢酶活性的调控。 ;结构与功能 2个调节亚基（R）+2个催化亚基（C）→PKA全酶复合体（R2C2）（无cAMP时，无活性） cAMP与特异R亚基结合→构象变化→成为R亚基二聚体+2个有活性C亚基,各种哺乳动物细胞可不同水平表达3种C亚基亚型(CαCβCγ)和4种R亚基亚型(RⅠ α RⅠ β RⅡ α RⅡ β) →结合成全酶PKA Ⅰ型和 Ⅱ型. ;;;2、DAG作用：激活蛋白激酶C,将存在于靶蛋白质中得丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化， 改变靶蛋白质的活性。如:糖原合成酶磷酸化后，停止合成糖原。 3、DAG与IP3的协调作用　　　IP3－ →细胞质中Ca2 + ↑－→ 糖原合成酶活性↑　　　蛋白激酶C－ →使IP3