高美华《医学免疫学》ELISA.pptVIP

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2017-04-24 发布于浙江
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高美华《医学免疫学》ELISA.ppt

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医学免疫学实验（三）免疫标记技术;检测Ag-Ab的体外实验;标记免疫技术=;常用的免疫标记物质;分类;主要试剂: 酶标记的抗体或抗原酶标物特点：免疫学活性酶对底物的催化活性;特点：灵敏度高、特异性强、准确性好酶标记试剂能够较长时间保持稳定操作简便、对环境没有污染。易与其它技术偶联衍生出适用范围更广的新方法。;;酶联免疫吸附试验（ELISA）——双抗体夹心法（双位点一步法）测甲胎蛋白（AFP） ;【临床意义】significance in clinical practise;一、ELISA双抗体夹心法测AFP原理;ELISA原理图;principle;抗AFPMcAb抗体;;二、试剂材料;三、method;（二） quality test 1．Add sample 取包被好的酶标板3各孔，分别加入阴性对照（25 ng/ml）、阳性对照（400 ng/ml）和待检标本各100ul 37℃20分钟。 2、wash：在各孔中加入洗液2滴,轻轻??动几下,弃之,然后用蒸馏水或自来水加满各孔,甩掉,反复5次,最后在吸水纸上拍干. 3、每孔加酶结合物2滴，37℃15分钟。 4、wash 5、显色每孔加底物和显色液各1滴，轻轻振摇，室温避光反应5分钟，加入2滴终止液终止反应。;四、result;【实验结果】Experiment’s results;五、Report