酶工程-张一哲 第五章 酶分子修饰.pptVIP

Chapter 5 Modification of Enzyme Molecule; 通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术过程。 属于酶分子工程的一部分。; 酶分子修饰的意义;第一节 金属离子置换修饰;一、金属离子置换修饰的方法;二、金属离子置换修饰的作用;第二节 大分子结合修饰; 大分子在使用前一般需经过活化，活化基团 才能在一定条件下与酶分子某侧链基团反应。;通过修饰提高酶活力;增加酶稳定性;降低或消除抗原性;第三节 酶蛋白侧链基团修饰; 其侧链功能基团有氨基、羧基、巯基、咪唑基、吲哚基、酚羟基、羟基、胍基、甲硫基等，这些基团可组成各种副键对蛋白质空间结构的形成和稳定起重要作用。这些功能基团发生改变，引起副键改变，使空间结构发生某些变化，从而引起酶特性和功能的改变。;（1）氨基修饰 （2）羧基修饰 （３）巯基修饰 （４）胍基修饰 （5）酚基修饰 （６）咪唑基修饰 （７）吲哚基修饰 （８）分子内交联修饰;三硝基苯磺酸（TNBS）是非常有效的氨基修饰剂。; 多肽链N-末端残基的化学修饰： 2,4-二硝基氟苯（DNFB）法、 丹磺酰氯（DNS）法、 苯异硫氰酸酯（PITC）法。;碳二亚胺修饰酶的羧基已成为最普遍的方法，条件温和。;巯基的化学修饰;1、烷基化试剂（如碘