小鼠黑色素瘤转移相关蛋白的差异蛋白质组学分析.pdfVIP

中国肿瘤临床 20 0年第37卷第5期 小鼠黑色素瘤转移相关蛋白的差异蛋白质组学分析* 班新超 李 熳 谷彦军 娄 丹 魏秀平 赵秀兰① 孙保存 摘要 目的：分析B16 F10黑色素移植瘤及其肺转移瘤的差异表达蛋白，以筛选黑色素瘤转移相关的分子标志。方法：应用 荧光差异凝胶电泳（two dimensional differential gel electrophoresis，2D DIGE）结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术（ma trix assisted laser desorption ionisation time of flight mass spectrometry，MALDI TOF MS）分离鉴定B16 F10黑色素移植瘤及其肺转 移瘤的差异表达蛋白，部分差异蛋白经Real time PCR进行mRNA表达水平验证。结果：Decyder6.0软件分析结果显示2D DIGE 图谱分辨率高、重复性好，30个蛋白点在实验组和对照组间存在表达差异（Ratio≥2，P0.01），经质谱分析和数据库查询鉴定出9 个蛋白在实验组表达上调，包括肌红蛋白（myoglobin，MB）、波形蛋白（vimentin，VIM）、磷酸甘油激酶1（phosphoglycerate kinase1， PGK1）、磷酸丙糖异构酶（Triosephosphate isomerase，TPI或 TIM）、重链结合蛋白（heavy chain binding protein，BiP）、α 烯醇化酶 （α enolase或enolase1）、β 肌动蛋白（β actin）、γ 肌动蛋白（γ actin）、层连蛋白结合蛋白（laminin binding protein），这些蛋白主要 参与了细胞骨架构成、糖酵解等生物学过程。Real time PCR结果显示糖酵解酶PGK1及TPI mRNA表达水平在实验组显著高于 对照组（P=0.001，0.003），变化趋势与蛋白质组学相一致。结论：小鼠黑色素瘤转移过程与多种蛋白的异常表达有关，糖酵解酶 PGK1、TPI可能参与了黑色素瘤的转移过程。 关键词 黑色素瘤 转移 差异凝胶电泳 糖酵解酶 B16 F10 doi:10.3969/j.issn.1000 8179.2010.05.002 Differential Proteomic Analysis of Metastasis-associated Proteins in Mice Melanoma BAN X nchao , LI Man , GU Yanjun , LOU Dan , WEI X up ng , ZHAO X u an2, SUN Baocun ,2 Correspond ng author: SUN Baocun, E-ma : baocunsun@gma .com Cancer Inst tute and Hosp ta of T anj n Med ca Un vers ty, Key Laboratory of Cancer Prevent on and Therapy, T anj n 300060, Ch na 2Department of Patho ogy, T anj n Med ca Un vers ty, T anj n 300070, Ch na Grant support: Nat ona Natura Sc ence Foundat on of Ch na Abstract Objective: To nvest gate d fferent a y expressed prote n prof es n B16-F10 grafted me anoma and ts me- tastas s n the ung n order to dent fy mo ecu ar markers of me anoma metastas s. Methods: D fferent a y expressed pro- te ns n B16-F10 grafted me anoma and ts metastat c es on n the ung were so ated and dent f ed by f uorescence two-d - mens ona d fferent a ge e ectrophores s (2D-DIGE) coup ed w th matr x ass sted aser desorpt on on sat on t me-of-f ght mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). Some of dent f ed prot