提高铁皮石斛药材利用效率探究.doc

铁皮石斛采后加工及提取方法对多糖的影响 李聪1，宁丽丹1，斯金平1，吴令上1，刘京晶1，宋仙水2，俞巧仙3 （1. 浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地 ，浙江 临安 311300；2. 乐清铁枫铁皮石斛生物科技有限公司，浙江 乐清325616；3. ，浙江 义 322000） [摘要] 目的：揭示采后加工及提取方法对铁皮石斛多糖的影响。方法：采用直接烘干、烫后烘干、边搓边烘、烫后边搓边烘4种方法，分别在不同温度下烘干后测定药材中多糖含量；以药材粉碎、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，采用L9(34)正交试验研究铁皮多糖的水煮溶出。结果：100 ℃和80 ℃处理的铁皮石斛药材多糖含量最高；80 ℃边搓边烘药材的干燥保留多糖成分 [关键词] 铁皮石斛；多糖；采后加工；水煮；苯酚-硫酸比色法 (Dendrobium officinale Kimura et Migo)具有益胃生津、滋阴清热等功效，2010年版《中国药典》单独收载，多糖含量是判断药材质量的主要依据[1,2]。铁皮石斛的加工，2010年版《中国药典》规定有两种方法：一是边加热边扭成螺旋形或弹簧状，烘干，习称“铁皮枫斗”；二是切成段，干燥或低温烘干，二者谁更科学尚不明确。铁皮枫斗的应用，民间常直接用于煲汤，但水煮过程如何令多糖成分快速溶出，至今未见报道。为提高铁皮石斛药材的质量，最大程度的发挥其保健及临床的功效，本文着重探讨了采后加工与水煮处理对铁皮石斛多糖的影响。 1材料与方法 1.1仪器和试剂 UV-2550紫外-可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DK-S24型电热恒温水浴锅（上海森信实验仪器有限公司）；JYZS M3525型紫砂煲（九阳股份有限公司），RE-121旋转蒸发（瑞士步琪公司）D-37520型高速离心机（德国 HERAEUS 公司-托利多仪器上海有限公司）。葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所，批号110833-200904）；所用试剂均为分析纯。 1. 2 材料及处理方法 采后加工试验 供试样品2012年9月采自中国森宇控股集团浙江省义乌市铁皮石斛种植基地。采集二年生铁皮石斛茎，除叶片后采用直接烘干、烫后烘干、边搓边烘、烫后边搓边烘4种方法，分别在不同温度下烘干后备用。① 直接烘干：将新鲜茎条分别在室温、60、80、100 ℃ 4个不同的温度下烘干；② 烫后烘干：先将新鲜茎条在沸水中浸烫5 min，捞出后分别在室温、60、80、100 ℃4 个不同的温度下烘干；③ 边搓边烘：先将新鲜茎条分别放在60、80、100 ℃烘箱内烘软，然后取出用双手揉搓，再放回原烘箱内烘一段时间（时间长短因温度及茎条干燥程度不同而不同），取出，用双手揉搓，如此反复5-8次，直至烘干；④ 烫后边搓边烘：先将新鲜茎条在沸水中浸烫5 min，然后分别放入60、80、100 ℃烘箱内烘软，反复搓烘，同方法③。 水煮提取效率试验 供试样品2012年4月采自浙江铁枫铁皮石斛生物科技有限公司生产基地，采集二年生铁皮石斛茎，除叶片后按传统铁皮枫斗加工工艺（边搓边烘）加工，以不同粉碎处理方法（A）、提取物料比（B）、提取时间（C）、提取次数（D）为考察因素（表1），进行L9(34)正交试验。采用家用紫砂煲进行水煮，试验过程中需适当补充水，水煮结束后补足差重。 表1 水煮提取效率试验因素水平表 Table 1 The factor levels of dissolution rate by boiled method 序号 A（粉碎处理） B（物料比） C（提取时间）/h D（提取次数） 1 粉碎 1/667 2 1 2 直接投料 1/1 500 8 2 3 润拍 1/5 000 24 3 注：“粉碎”指将铁皮枫斗粉碎并过60目筛，“直接投料”指整颗枫斗直接用于提取，“润拍”指枫斗用湿纱布包裹润透后拍扁后用于提取。物料比1/667：铁皮枫斗3.0 g/水2 L；1/1 500：铁皮枫斗1.0 g/水1.5 L)、1/5 000：铁皮枫斗0.4 g/水 2 L。 1. 3 多糖测定 1.3.1 样品处理 铁皮石斛样品烘干后粉碎，过60 目筛。按药典方法取各样品粗粉0.3 g，精密称定，加水200 mL，加热回流提取2 h，放冷，转移至250 mL容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，摇匀，虑过，精密量取取续滤液5 mL，置50 mL离心管中，精密加入无水乙醇25 mL，摇匀，冷藏1 h，取出，离心（转速为4 000 r·min-1）20 min，弃去上清液，沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次20 mL，离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解，转移至50 mL量瓶中