天然产物香菇的提取教程.pptVIP

天然产物香菇的提取;主要内容;有关香菇的历史;香菇概述;;香菇也是我国一种著名的药用菌，历代的医药学家对香菇的药性及功用均有著述。 《本草纲目》认为香菇“甘、平、无毒”； 《医林纂要》认为香菇“甘、寒”，“可托痘毒”； 《日用本草》认为香菇“益气、不饥、治风破血”； 《本经逢原》认为香菇“大益胃气”； 《现代实用中药》认为香菇“为补偿维生素D的要剂，预防佝偻病，并治贫血”。 总之，香菇具有：????? 抗病毒、抗肿瘤、快速增强人体免疫功能和刺激干扰素形成的作用；另可增加人体对钙的利用；纠正人体酶缺乏症。 ;香菇生长环境及分布;目前生产情形;选购香菇;香菇的主要成份;香菇多糖;;香菇多糖为一种β-D[1→3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1→6)葡萄糖残基的葡聚糖。重复结构单位一般含有7个葡萄糖残基，其中2个残基在侧链上，化学结构如附图所示。 ;香菇多糖的提取工艺;水提醇沉提取工艺;;刘树兴等将香菇(子实体)经水浸提液浸提，再经减压浓缩，Sevag法去除游离蛋白、乙醇沉淀得到香菇多糖蛋白粗品。通过正交实验分别得到制备浸提液的最优工艺条件：温度85℃，时间5h，加水量150m1；除蛋白的最优工艺条件：样液:氯仿-正丁醇(体积比)=3，氯仿:正丁醇(体积比)=5；而乙醇体积分数为70%时可沉淀出较多的糖蛋白。经过纯度鉴定可得到纯度为86. 3%的糖蛋白粗品。;超声提取工艺;KQ—100超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、旋转蒸发器RE—52AA(上海亚荣生化仪器厂)、LXJ—II离心机(上海医用分析仪器厂)、TU —1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司) 香菇(产地:福建古田)、葡萄糖、95%乙醇、浓硫酸、5%苯酚、乙醚、丙酮均为分析纯。;超声作用对提取率的影响;由表1,2可知，随着超声时间和功率的增加，提取率逐渐增大，但提取时间13 min及功率80 W之后，提取率增加很少。考虑到经济性和超声处理时间过长、功率过高会使多糖降解，降低多糖活性，实验最后将超声处理时间确定为13 min，功率为80 W较为适宜。;超声作用对提取液物性的影响;超声作用对提取料液比的影响;超声作用对提取时间的影响;利用超声波辅助热水，从香菇中浸提香菇多糖，不仅能缩短提取时间，减小料液比，提高提取率，降低生产成本;而且能降低提取液枯度和表面张力，对降低此后的超滤分离的阻力和减少浓差极化的影响，都有经济上的积极意义。 ;超滤提取工艺;;超滤膜的分离特性;温度的影响;压力影响;pH值影响;与其它提取工艺相比,该工艺具有工艺路线简单、提取时间短及醇析所用的乙醇试剂用量少等特点，且可回收其他提取工艺都丢弃的低聚糖(小分子多糖)。同时，经超滤后的透过液，根据超滤膜的截留分子量不必增加除蛋白与醇析这两道工序使工艺流程变短。;酶法提取工艺;酶解过程中不同因素对香菇柄多糖提取率的影响;酶解pH值 46 ℃ ，不同pH值，酶解80min ，酶解后中和，加20倍dH20 ，90 ℃浸提80min，结果如图2。 当酶解pH值在4. 5—5. 0时酶活力较大，其中以pH 4. 5为最佳，此时菇柄多糖的提取率最大。;酶解时间 在46 ℃，pH4.5时，不同酶解时间作用后中和加20倍dH2O ，90 ℃浸提80min，结果如图3。菇柄多糖的提取率并不随酶促反应时间的延长而著增加，只有在作用80min时及时提高温度进人热水浸提阶段，才有利于菇柄多糖的溶出。;微波辅助浸提工艺;图1表示加入150ml的超纯水后，在不同微波加热时间情况下，浸提液体积和总糖含量随时间的变化曲线。;总之，微波辅助浸提以高回收率、高选择性、快速加热、易于控温及设备尺寸减小，无污染能源的利用、减少废物及产品的污染等一系列优点，越来越引起人们的重视。利用该方法提取香菇多糖，操作方法简单，而且利用补充浸提液体积与碱液相结合的方法可以提高多糖的得率，成为香菇多糖生产的一个实际可行的新颖方法。 但是这个方法还需进步完善，例如对微波炉进行改造，使微波的频率、功率和加热时间可以控制，同时可以完成浸提液的回流循环，提高浸提液的利用率。另外对工艺的连续性需要进一步实验。;多糖含量的测定方法;目前多糖含量测定大多采用Dubois等提出的苯酚-硫酸比色法。 该方法的原理是:多糖被浓硫酸水合产生的高温迅速水解成单糖，单糖在这种强酸性条件下与苯酚反应生成橙黄色衍生物。一定浓度范围内衍生物在波长490nm处的光度吸收值与糖浓度呈线性关系，从而可用比色法测定其含量。 但此方法在测定多糖含量时，要求被测溶液本身无颜色或颜色较淡并且溶液中其他组分在490nm左右无明显吸收或吸收甚小，然而中药单方或复方的煎液或冲剂往往有很深的棕褐色，对测定产生干扰，所以测定前一般要经过活性碳脱色或其他处理，费??费力。