(a)典型的微流控芯片-北大未名BBS.ppt

第七章;7.1 导言;1950s，“连续流动分析”技术发展起来了。它的基本方法是把 各种化学分析所要用的试剂和试样按一定的顺序和比例用管道 和泵输送到一定的反应区域，进行混合，完成化学反应，最后 经检测器检测并由记录仪显示分析结果，实现了管道化的自动 连续分析。但这些分析仍建立在化学平衡的基础上，速度受到 限制。 丹麦技术大学的J.Ruzicka 和E.H.Hansen于1975年提出了流动注 射分析(Flow Injection Analysis，FIA)的新概念。把试样溶液直 接以“试样塞”的形式注入到管道的试剂载流中，不需反应进行 完全，就可以进行检测。摆脱了传统的必须在稳态条件下操作的 观念，提出化学分析可在非平衡的动态条件下进行，从而大大提 高了分析速度。一般可达每小时进样100~300次。从样品注入到 检测器响应的时间间隔一般小于1 min。设备较简单并灵活，操 作简便，启动和关机时间仅需几分钟，因此FIA技术不仅适于大 批量的常规分析，也适于少量非常规样品的自动测定。;FIA是一种良好的微量分析技术，一般每次测定仅需25~100 ?L样品溶液。由于样品与试剂用量甚微，又在封闭系统中完 成测定，因此极大地降低了对人体的毒害和对环境的污染。 现代分析化学的发展趋势是向现场、实时、动态、 高灵敏度、高选择性、高通量的方向发展！ 1990s初期发展起来的微全分析系统(微流控芯片、生 物芯片和芯片实验室)为实现上述目标提供了可能性。 ;7.2 流动注射分析; 图7.1 对流和扩散作用 (a)无分散；(b)对流引起的分散；(c)对流和径向扩散引起 的分散；(d)径向扩散引起的分散 ;例如，以分光光度法测定Cl-，所基于的反应是：;这些实验清楚地显示了FIA的基本特点：在样品通过分析流路 时，以完全相同的方法顺序处理所有的样品。即对一个样品如 何处理，对其他任何样品也以完全相同的方法进行处理。流动 注射体系中准确体积样品的注入、重现和精确的定时进样以及 从注入点到检测点体系的完全相同的操作（所谓控制或可控分 散），形成注入样品的浓度梯度，从而产生瞬间的、但可精确 重现的记录信号，使得流路中的任何一点都能像稳态一样准确 测量。一般用峰值作为分析信号，可以获得较高的灵敏度。;7.2.1.2 分散系数 为了合理地设计FIA体系，需要知道原始样品溶液在它流到检测 器的途中稀释的程度，以及从样品注入到读数消耗了多长时间。 定义分散系数(dispersion coefficient, D)为 D＝ c0/c (D 0) (7.1) 式中c0为注入样品中分析物的浓度， c为检测器中分析物的浓度。 分散系数主要受三种相互作用且可以控制的变量的影响，即样品 体积、管的长度和流动速度。 ;设计FIA体系时，需根据实验目的综合考虑各种因素的影响，以 确定最佳流路。例如，建立的FIA系统是用于常规大批量分析的， 那么提高分析速度、增加进样频率就是要考虑的主要方面，就应 当减少进样体积，缩短管长，提高流速。 分散系数大致可分为4种情况：有限的（D=1~3）、中度的（D=3 ~10）、高度的（D10）以及减小的（D1）。相应设计的FIA体 系已被用于各种各样的分析任务。当注入的样品以未被稀释的形 式被运载到检测器时，采用的是有限分散，也就是将FIA体系用 作将样品严格而准确地运载到检测装置（如离子选择电极、原子 吸收分光光度计等）的工具。当待测物必须与载液混合并发生反 应，以形成要检测的产物时采用中度分散。只有当样品必须被稀 释到测量范围内时才应用高度分散。减小的分散意味着检测的样 品浓度高于注入的样品浓度，即发生了在线预浓缩（例如通过离 子交换柱或经过共沉淀等）。 ;7.2.2 流动注射分析仪的基本组成 FIA仪一般由流体驱动单元、进样阀、反应管道和 检测器组成。 7.2.2.1 流体驱动单元 ;在流动注射体系中，最常见的是用蠕动泵驱动溶液。图7.3表明 了蠕动泵的操作原理。 蠕动泵一般都有8~10个排列成圆圈的滚轴，通过转动的滚轴将 液体压进塑料或橡胶管。流速由马达的转速和管子的内径控制。 若固定蠕动泵的旋转速度, 流速就由每个管子的内径决定。商品 化的管子具有0.25~4mm的内径，允许流速最小为0.0005 mL/min， 最大为40 mL/min。蠕动泵可以进行几个管子的同时操作，特别 适于应用多种试剂但又不能预先混合的情况。FIA也可以用活塞 泵，但价格较贵，且只允许单流路传送，对于多路管线，则需 几个单独的泵。 ;7.2.2.2 进样阀 进样阀(valve for injection)又称采样阀、注入阀或注射阀。用 得最多、且效果最令人满意的是类似于高效液相色谱（HPLC） 中所用的旋转式六通阀