细胞生物学-细胞核与染色体幻灯片1.pptVIP

Cell Nucleus and Chromosome;间期的细胞核的形态结构;◆外核膜 ◆内核膜 ◆核纤层 ◆核周间隙 ◆核孔复合体;;核纤层;（二）核被膜在细胞周期中的崩解与装配 ;核孔由至少50种不同的蛋白质构成。 核孔在核膜上的密度很大，一个典型的哺乳动物细胞核膜上有3000-4000个核孔。 转录功能活跃的细胞，其核孔复合体数量较多。;电镜下显示的核孔复合体;Cytoplasmic face －cytoplasmic particles;Nuclear face－basket inner complex;（1）从横向上看，核孔复合体由周边向核孔中心依次可分为环、辐、栓三种结构亚单位； （2）从纵向上看，核孔复合体由核外（胞质面）向核内（核质面）依次可分为胞质环、辐（＋栓）、核质环三种结构亚单位。 综合起来，核孔复合体主要有以下4种结构组分：; 核孔复合体主要由蛋白质构成，其总相对分子质量约为125×106，推测可能含有100余种不同的多肽，共1 000多个蛋白质分子。 ? gp210：结构性跨膜蛋白 ? p62：功能性的核孔复合体蛋白，具有两个功能结构域 ;蛋白名称;gp210：结构性跨膜蛋白;p62：功能性的核孔复合体蛋白，具 有两个功能结构域 ? 疏水性N端区：可能在核孔复合体功能活动 中直接参与核质交换 ? C端区：可能通过与其它核孔复合体蛋白相 互作用，从而将p62分子稳定到核 孔复合体上，为其N端进行核质交 换活动提供支持。 ;核孔复合体的功能;1. 通过核孔复合体的被动扩散 核孔复合体作为被动扩散的亲水通道，其有效直径为9～10nm，有的可达12.5nm，离子、小分子以及直径在10nm以下的物质原则上可以自由通过。;主动运输的选择性表现在以下三个方面： （1）对运输颗粒大小的限制。主动运输的功能直径比被动运输大，约10～20nm，甚至可达26nm。核孔复合体的有效直径的大小是可被调节的； （2）通过核孔复合体的主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需要能量； （3）通过核孔复合体的主动运输具有双向性，即核输入与核输出，它既能把复制、转录、染色体构建和核糖体亚单位组装等所需要的各种因子运输到核内；同时又能将翻译所需的RNA、组装好的核糖体亚单位从核内运送到细胞质。;核蛋白运输机制 ;核定位信号(nuclear localization signals , NLS);核蛋白输入机理;NLS只是亲核蛋白入核的一个必要条件，某种亲核蛋白是否被转运入核还受到其它因素的影响。;染色质的概念;DNA分子一级结构具有多样性;DNA二级结构的多样性;(二)染色质蛋白质;五种组蛋白在功能上分为两组： ◆核小体组蛋白： 包括H2A、H2B、H3和H4, 作用是与DNA组装成核小体,相对分子质量较小(102～135个氨基酸残基), 它们的作用是将DNA分子盘绕成核小体。它们没有种属及组织特异性, 在进化上十分保守。 ◆ H1组蛋白： 不参加核小体的组建,在构成核小体时起连接作用,并赋予染色质以极性。H1有一定的组织和种属特异性。H1的相对分子质量较大, 有215个氨基酸残基, 在进化上也较不保守。; ;特性: ?非组蛋白具多样性和异质性。包括多种参与核酸代谢与修饰的酶类如DNA和RNA聚合酶、核质蛋白、染色体骨架蛋白、肌动蛋白和基因表达调控蛋白等。 ?对DNA具有识别特异性, 识别信息来源于DNA核苷酸序列本身，识别位点存在于DNA双螺旋的大沟部分。识别与结合靠氢键和离子键。 ?呈酸性、带负电荷。;● 参与染色体的构建: 这方面的作用与组蛋白相辅佐。组蛋白把DNA双链分子装配成核小体串珠结构后, 非组蛋白则帮助折叠、盘曲, 以形成在复制和转录功能上相对独立的结构域;;二、染色质的基本结构单位—核小体; 用温和的方法裂解细胞核，将染色质铺展在电镜铜网上，通过电镜观察，未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构，念珠的直径为10nm ;（2）核酸酶水解从大鼠肝细胞中分离的染色质;Gel electrophoresis after removal of chromatin proteins;（3）应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术，研究染色质结晶颗粒 ; 用SV40病毒感染细胞，病毒DNA进入细胞后，与宿主的组蛋白结合，形成串珠状微小染色体，电镜观察SV