基因分离定律的验证.docx

果蝇杂交实验 实验人：经燕珊（1431057）、韦丞佳（1431058）、韦海浪（1431059）、韦彩岭（1431060）、韦海涛（1431061） 实验时间：9月-12月 实验地点：生技楼202 实验材料及方法 1.1实验材料 果蝇品系及性状：Canton-s黑体红眼果蝇、yw黄体白眼果蝇、w118灰体白眼果蝇 1.2实验用品 培养基成分：玉米粉、白砂糖、酵母粉、琼脂粉、丙酸 麻醉：乙醚，麻醉瓶，棉签，牙签。 分析性状：镊子、解剖镜，滤纸。其他试剂和用具：75%乙醇、饲养瓶（指管）、棉花、纱布、棉球、棉绳、微波炉、恒温培养箱、电热炉、铝锅、天平、烧杯； 1.3培养基的配制 量取760ml水，160g玉米粉，62g白砂糖放到同一个铝锅，搅匀，电热炉加热，直到稍微感觉到粘稠加入6g琼脂粉，搅拌，煮开之后加入16g酵母粉，必须搅匀。关上电热炉，待培养基稍微冷却（大概50℃-60℃），加入6ml丙酸，搅匀即可。 1.4实验流程 1.4.1果蝇的基本培养方法 （1）麻醉方法 先轻轻敲打培养瓶，让果蝇落倒培养瓶的底部，取下瓶塞，然后迅速将培养瓶口向下扣在麻醉瓶口上，使两瓶口对正对严，以防飞逸。 麻醉瓶在上，使果蝇向上爬入麻醉瓶中，取一棉花塞塞住瓶口，翻转麻醉瓶使其瓶口朝上，迅速将含有乙醚的棉签放入其中，盖住瓶口，约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 （2）果蝇交配 ①收集处女蝇：处女蝇指雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力的果蝇。先把培养瓶中的老果蝇全部放飞，收集10小时之内羽化出来的新果蝇，麻醉后用解刨镜将果蝇雌雄分开，这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。先不要放入雄蝇，3天后看雌蝇是否产卵，如果产卵就不是处女蝇了。 ②交配：杂交时把所需品系的雄蝇直接放到处女蝇培养瓶中，贴好标签，注明两亲本的基因型及交配日期，进行培养。6～8天后倒掉亲本（一定要倒干净，以免亲代和子代混淆），待F1成蝇羽化后开始计算，观察性状。可靠的计数及观察是培养开始的20天以内（再晚F2也可能有了）。若须继续实验，观察F2，可在F1内挑出雌雄数对，另外培养，因为这次是用F1作亲本，进行个体间互交，所以这时不是处女蝇也可以。 1.4.2本实验具体操作 本实验验证孟德尔的基因分离定律，以眼色为观察指标。收集300左右只子代即终止实验。 （1）Canton-s♀黑体红眼×yw♂黄体白眼 收集5只Canton-s♀黑体红眼处女蝇果蝇与yw黄体白眼果蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 （2）Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼 收集5只Canton-s♂黑体红眼果蝇与yw黄体白眼处女蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 （3）Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼 收集15只Canton-s♂黑体红眼果蝇与w118黑体白眼处女蝇杂交，6天后放飞亲本，第7天收集F1。 实验结果及分析 Canton-s♀黑体红眼×yw♂黄体白眼 F1眼色全部为红眼，红眼雌性有150只，红眼雄性有145只。从F1中拿出60只分三组进行自交实验，每组有10只红眼雌性，10只红眼雄性。 F2中，红眼的都为雌性，白眼的都为雄性。 红眼雌性白眼雄性第一组178172第二组155157第三组178176合计511505 子二代的х2检验 红眼雌性白眼雄性合计实得数5115051016预期数5085081016实得数-预期数330（实得数-预期数）2/预期数0.0060.0060.012n=1 х2=0.012 0.75P0.95 实得数与理论值没有显著差异，符合孟德尔的基因分离定律。 Canton-s♂黑体红眼×yw♀黄体白眼 F1中，红眼的都为雌性，白眼的都为雄性，红眼雌性有177，白眼雄性有171。从F1中拿出60只分三组进行自交实验，每组有10只红眼雌性，10只红眼雄性。 F2 红眼白眼♀♂♀♂第一组177178181168第二组170160160170第三组187185187188合计534523528526子二代的х2检验 红眼雌性白眼雄性合计♀♂♀♂实得数5345235285262111预期数527.75527.75527.75527.752111实得数-预期数6.254.750.251.750（实得数-预期数）2/预期数0.07400.04280.00010.00580.1227n=3 х2=0.1227 0.99P 实得数与理论值没有显著差异，符合孟德尔的基因分离定律。 （3）（3）Canton