混饲恩诺沙星对小鼠肝微粒体苯胺羟化酶活性的影响.doc

混饲：恩诺沙星对小鼠肝微粒体苯胺羟化酶活性的影响 2008级动物医学（2）班 王亚 指导老师 孙素玲（教授） 摘要 目的：研究恩诺沙星对小鼠肝微粒体苯胺羟化酶活性的影响。方法：40只小鼠随机分为5组，公母各半；组Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ为试验组。每天分别饲喂剂量为50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg和200mg/kg的氧氟沙星，组Ⅰ为对照组，每天饲喂相同饲料，每天饲喂前禁食4h，后6h开始给食，持续饲喂四周，各组自由饮水。采用钙沉淀法制备小鼠肝微粒体，用测定代谢生成的对-氨基酚量的方法来测定苯胺羟化酶的活力。 结果 四个试验组的苯胺羟化酶的活力分别为190.459±47.406 nmol/（mg.min）、131.827±53.320 nmol/（mg.min）、32.196±10.705 nmol /（mg.min），对照组为419.404±198.971 nmol/（mg.min）。与对照组相比，4个试验组苯胺羟化酶的活力都显著下降（P＜0.01），且随着剂量的增大而活力下降。结论： 恩诺沙星在50mg/kg—200mg/kg范围内能降低苯胺羟化酶的活性。 关键词 氧氟沙星 ；肝微粒体；苯胺羟化酶 恩诺沙星 ( C19H22FN3O3) 又名乙基环丙沙星,是第一个动物专用的氟喹诺酮类抗菌药物, 1987年由德国拜耳公司首创投放市场, 我国在 1992 年由广东海康兽药厂研制成功, 其具有杀菌活性强、抗菌谱广、生物利用度高、毒副作用小等优点[1]。研究恩诺沙星的稳定性, 对于保证药物的安全有效、提高药剂疗效、减少给药次数、延长贮存期以及实际生产和药剂用量有重要作用[2]。陆英杰等研究出恩诺沙星在短期内对实验小鼠免疫细胞有影响,尤其是T淋巴细胞[3]。孙素玲、程玲玲等研究钼酸胺口服剂量在8.325 mg/kg~66.6 mg/kg范围内能使大鼠苯胺羟化酶的活力增强[4]。曾五和(2002)等[5]、罗雅劲(2010)等[6]对恩诺沙星不同剂型在猪体内的药动学及生物利用度进行研究，结果显示，恩诺沙星剂型不同，在体内吸收、达峰时间及消除半衰期时间存在差异。余建娣等按磺胺间甲氧嘧啶 - 恩诺沙星 2m l(含磺胺间甲氧嘧啶 0. 1 g, 恩诺沙星 0. 05 g)试验剂量对 20只大白鼠进行腹腔注射, 常规饲养8d未见任何动物死亡, 故大白鼠对磺胺间甲氧嘧啶- 恩诺沙星的最大耐受剂量 ( MTD ) 0. 5 g / kgBW( 以磺胺间甲氧嘧啶计 ) 。即 M TD 大于规定使用剂量 25倍以上, 休药期应考虑在 28d以上[7]。关于恩诺沙星的研究目前国内只限于对微生态方法,关于恩诺沙星对机体的毒性作用，肝脏苯胺羟化酶活性的影响报道甚少,为此本试验通过对实验小鼠肝脏苯胺羟化酶活性影响的动态观察，为评价不同剂量的恩诺沙星对人和动物生物酶活性的影响，钒的安全评价等提供参考。 1材料 1.1动物的选择和处理 小白鼠40只，体重20—23g，安徽科技学院实验动物中心提供。观察饲养两周。1.2 主要试剂 恩诺沙星：分析纯，合肥工业大学试剂厂，批号为030516；0.9%氯化钠溶液：安徽环球药业股份有限公司，批号为041025—2；蔗糖：分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司，批号为三羟甲基氨基甲烷：分析纯，北京化学试剂公司，批号为031009；氯化钾：化学纯，中国上海试剂一厂，批号为04—06—57；氯化钙：分析纯AR，国药集团化学试剂有限公司，批号为氯化氢溶液：分析纯，上海东懿化学试剂公司，批号过氧化羟基异丙苯：化学纯CP，中国医药集团上海化学试剂公司，批号为盐酸苯胺：分析纯AR，中国医药集团上海化学试剂公司，批号为三氯乙酸：分析纯，上海化学试剂采购供应站经销，批号为030114；无水碳酸钠：化学纯，山东博山试剂厂，批号为030508；氢氧化钠：分析纯，宜兴市第二化学试剂厂，批号为030401；苯酚溶液：分析纯AR，上海兴达试剂厂出品，批号为040301；对-氨基酚：化学纯CP，国药集团化学试剂有限公司，批号为硫酸铜：化学纯，合肥工业大学化工厂，批号为040214。 1.3 主要仪器 FA1004N型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；YP600型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；TDL80—2B型低速台式离心机，上海安亭科学仪器厂制造；TGL—16C型高速台式离心机，上海安亭科学仪器厂制造；DY89—I型电动玻璃匀浆机，宁波新芝科器研究所；THZ—C恒温震荡器，太仓市光明分析仪器厂；HH—S恒温水浴锅，江苏国胜实验仪器厂；BCD—502F型冰箱，青岛海尔冰箱股份有限公司；721型分光光度计，上海精密科