第12章植物体细胞胚胎发生.ppt

第十二章 植物体细胞胚胎发生;第一节 体细胞胚胎发生的方式 第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 第三节 体细胞胚胎发生中基因表达与调控 ;第一节 体细胞胚胎发生的方式;一、体细胞胚胎发生（Somatic embryogenesis）的特点 **植物的胚胎发生是从合子开始的。 **单细胞悬浮培养、原生质体培养和花粉培养中都观察到体细胞胚胎发生或花粉胚胎发生（pollen embryogenesis） **合子发育的胚胎为二倍体的体细胞产生的胚状结构 **体细胞胚胎是由小孢子或其分裂产物等单倍体细胞产生的体细胞胚，通常称花粉胚（pollen embryos），可发育成单倍体植株。 ;花粉培养;**体细胞胚或花粉胚都是指在植物组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的胚状结构，包括以下几点含义： 1、体细胞胚是组织培养的产物，区别于无融合生殖的胚，只限于在组织培养范围使用； 2、体细胞胚起源于非合子细胞，区别于合子胚； 3、体细胞胚形成经历胚胎发育过程，区别于组织培养的器官发生中芽与根的分化。;植物体细胞胚胎发生和诱导器官发生相比 具有明显的特点： 1具有两极性 2存在生理隔离 3遗传性相对稳定 4重演受精卵形态发生的特性 ; (A) 伸长期合子；(B) 合子经过第一次分裂, 产生1 个顶细胞(绿色)和一个基细胞(粉红色)；(C) 四分体胚: 顶细胞经历2 次纵向分裂，产生含有4 个细胞的胚体和2 个细胞的胚柄；(D) 16 细胞球形胚: 8 细胞胚的所有细胞经过1 次平周分裂, 产生包含8 个细胞的表皮原和8 个细胞的内部组织；(E) 早期心形胚；(F) 心形胚: 子叶和胚根原基已经出现；(G) 成熟胚胎。 1: 顶细胞; 2 : 基细胞; 3: 胚根原细胞, 形成未来的ROC 和根冠中央区; RM: 根尖生长点; SM: 茎尖生长点 图6.2 双子叶植物拟南芥的胚胎发育过程;第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 ; 1、基因型与体细胞胚发生 基因型是影响体细胞胚发生的重要因素，体细胞胚的诱导率和每个胚性外植体上体细胞胚的发生率因基因型而异 ;（a）不同基因型体细胞胚诱导率； （b）不同基因型每个胚性外植体上体细胞胚的数目 图6.7 在相同培养基上Feijoa sellowiana Berg不同基因型体细胞胚诱导 （引自Miguel等，2001）;2、植物激素与体细胞胚发生 **离体植物细胞在开始往往缺乏合成生长素和细胞分裂素的能力，但是在大多数情况下，这些细胞的分裂和分化以及形态建成过程中又必需生长素和细胞分裂素两种激素的共同作用。 **在培养介质中添加不同种类或不同浓度的外源激素诱导形态发生已受到广泛的重视。 **但最关键的是组织内部和体细胞胚发生部位的内源激素代谢动态和平衡。 ;（1）、内源激素与体细胞胚发生 早在胡萝卜细胞悬浮培养体细胞胚发生中发现，2，4-D在诱导胚性细胞早期是必需的，而且2，4-D是通过影响IAA结合蛋白起作用，其实质是促进IAA结合蛋白的形成，提高细胞对IAA的敏感性从而诱导胚性细胞的形成。 ;（2）外源激素与体细胞胚发生 ① 2，4-D与体细胞胚发生 2，4-D是诱导多种植物离体培养体细胞转变为胚性细胞的重要激素。 单子叶植物和双子叶植物诱导体细胞胚胎发生时，所要求的2,4-D的浓度不同，对单子叶植物而言，一般要求较高浓度的2,4-D，其浓度范围为0.5-5mg/L，通常使用浓度为2mg/L； 而对双子叶植物而言，一般要求较低浓度的2,4-D，其浓度范围为0.02-1mg/L，通常使用的浓度为0.1mg/L。 ;;② 其它生长激素与体细胞胚发生 除2,4-D外，ABA对植物体细胞胚的发生也起到重要的调控作用。 研究表明，ABA具有促进苈蒿体细胞胚结构正常化的显著效应。 在浓度适宜时，ABA能抑制多种异常体细胞胚的发生，而且ABA加入培养基的时间愈早其效应也越明显。 较低浓度的ABA对保持籼稻愈伤组织的胚性结构具有重要意义，可明显提高这种胚性愈伤组织分化出苗率。 在拐芹中ABA与NAA共同作用可诱导一些游离氨基酸含量的变化和特异蛋白的形成。 ABA和PEG对胡萝卜(Daucus carota L.)体细胞胚发生具有调控作用 ;（3） 多胺（腐胺、尸胺、亚精胺、高亚精胺、精胺等）和乙烯与体细胞胚发生;② 金属离子 **金属离子对体细胞胚的发生也有影响。 **在小麦愈伤组织诱导体细胞胚发生中也发现Zn2+、Cu2+、Co2+、Mn2+等金属离子具有重要的促进作用，不仅可提高诱导频率，而且还可以加速胚性愈伤组织的形成，因此，在培养基中加入适合浓度金属离子可提高体细胞胚发生的频率。 **有研究表