人教版生物选修1： 2、2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课件.pptx

;两个主要目的： 　　(1)从土壤中分离出能够分解尿素的细菌； 　　(2)统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。;;培养基配方;　　在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。;1．直接计数法： 　　最常用显微镜直接计数法。 　　先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。;优点：　　设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：　　难以计数微小量多的细菌。　　 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。;2．间接计数法： 　　最常用稀释平板计数法。;;;　　统计的菌落往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。;　　 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 　　1.第一位同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 　　2.第二位同学在该深度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以这三个平板菌落数的平均值163作为统计结果。;; 因此，这两位同学的实验需要改进，在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。;;　　但是，A同学确信自己的实验操作准确无误，与其他同学的结果之所以不相同，是因为自己所选用的土壤样品不同。但是，A同学在设计实验的时候并没有设置对照，因而此时也拿不出令同学们信服的证据。 　　你能通过设置对照，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素吗？;　　一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。 一种方案：可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。;另一种方案： 将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;;土壤中某样品细菌的分离与计数; 制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基，准备好无菌试管和移液管。　; 将10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中,充分摇匀，吸取上清液1mL，转移至盛有9mL水的无菌试管中，依次等比稀释至107稀释度，并按照由107至103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板，不必更换移液管。　;　　将涂布好的培养皿放在30℃下培养。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。 　　挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中，观察能否变红。; 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。　;;[一]无菌操作 　　1.取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 　　2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。 　　3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。;[二]做好标记 　　注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。 [三]制订计划;　　1.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）( )　　A. 2.34×108　　B. 2.34×109　　C. 234　　D. 23.4 ;　　1.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）( )　　A. 2.34×108　　B. 2.34×109　　C. 234　　D. 23.4 ;　　2.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比　　　　　　　　　　　　（　　 ）　　A.比实际值高　　B.比实际值低　　C.和实际值一致　　D.比实际值可能高也可能低;下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 A. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、　葡萄糖、尿素、琼脂、水 B. KH2PO4、NA2HPO4、Mg