复旦大学生化课件噬菌体策略.pptVIP

第四章 噬菌体策略Phage strategies ;一些概念;1 裂解周期（lytic cycle ）;噬菌体颗粒（particle） 感染（infection） 附着（attach） DNA被注射进细菌 早期发育（early development） 产生DNA合成酶类 DNA复制开始 晚期发育（late development） 产生基因组、头、尾 DNA包装进头，尾附着 裂解（lysis） 细胞破裂释放出子代噬菌体;裂解发育的2个时期;裂解发育的基因表达;裂解表达的级联控制;级联控制的2种途径;2 溶源（lysogeny）;溶原和裂解的相互转化;噬菌斑（plaque） 最初一个噬菌体感染一个细胞，裂解释放的子代噬菌体又感染旁边的细胞，感染的连锁反应呈放射状分布，逐渐形成一个噬菌斑 烈性噬菌体形成清晰的噬菌斑 温和的噬菌体形成浑浊的噬菌斑;3 λ噬箘体的表达调控; λ噬菌体的操纵子;3.1 λ噬菌体的裂解途径;早早期基因的表达;抗终止（antitermination）;抗终止依赖特定的位点;nut位点;PR迟早期基因表达;PL迟早期表达;裂解级联依赖抗终止;3.2 λ噬菌体的溶源途径;PR迟早期表达;pN作用下的迟早期转录，从PL开始的转录表达cIII、xis、int （ N蛋白不再介绍） cIII可以保护cII 蛋白 cII单独存在的半衰期 1 min； 有cIII时的半衰期 ~ 5 min Xis一般认为是原噬菌体切除所必需的 Int一般认为是前噬菌体整合所必需的 值得注意的是，这里的xis和int由于sib位点的反向调节（retroregulation ），并不表达出蛋白;反向调节（retroregulation）;cII 是溶源所必需的，没有或者量不够， λ都不能进行溶原生长 cII 是建立溶源所必需的，但维持溶源是不需要的;细胞中cII的水平; CII激活的转录;PROMOTER;PRE晚期表达;PRM和PRE;PaQ晚期表达;PI晚期表达;3.3 λ噬菌体的表达调控;操纵基因;操纵基因突变;调节蛋白;各种λ噬箘体突变型的溶原化频率;cI蛋白是阻遏物;cI产物作用在λ噬菌体的特定位点 λimm 434、 λimm 21的免疫区被取代，可以在溶原化的细菌中复制繁殖 cI蛋白是专一性的，一种噬菌体的阻遏蛋白只作用它本身的免疫区;cI蛋白的结构;遗传学分析;生化分析;cI蛋白对操纵基因的保护;cI与操纵基因的结合;cI蛋白N端与操纵基因的结合;cI蛋白与3个操纵基因亲和力： OR1OR2 ≥OR3 邻近位点上的cI蛋白二聚体由于缔合作用而有协同效应 cI蛋白的N端片段不具有协同效应;cro蛋白的结构和功能;cro蛋白与操纵基因的结合;cro和cI对转录的影响;融合操纵子技术; cI和cro对PRM、PR的影响;cI蛋白的自我调节;3.6.7 cI蛋白的正控制机制;Interaction between the l? repressor dimer and DNA.? Each l? repressor contains a helix-turn-helix motif.? One of helices fits into the major groove of DNA;l噬菌体的开关