第八章 现代生物技术育种.ppt

第八章 现代生物技术育种;第一节 生物技术应用于育种的必要性 第二节 组织培养 第三节 植物原生质体培养和细胞融合 第四节 基因工程 第五节 分子标记及其在育种中的应用;第一节 生物技术应用于育种的必要性;（二）生物技术应用于育种的必要性; 生物技术应用于作物育种，可以解决传统育种的一些特殊困难，扩大育种的基因来源，提高鉴定和选择的可靠性，加快育种进程，加速繁殖，提高育种效率等，对于解决新世纪人口与食物问题，以及生物能源问题，具有十分重要意义。;现代生物技术发展简况;1962 年，Arber 发现大肠杆菌对外来侵入的 DNA 有限制作用，这是由于菌体内有一种酶，对外来的 DNA 起切割、分解的作用，从而预言DNA限制性内切酶的存在。 1966 年Weiss 和 Richardson 发现了DNA 连接酶。 1968 年，Smith 分离出第一个内切酶。 1971 年， Nathans 应用Smith 的内切酶切割 SV-40 病毒的 DNA ，获得了第一个 DNA 的内切图谱（通称“物理图谱” physical map）。; ; ;概念 是指在无菌条件下，将离体的植物材料培养于人工培养基上，并给以适当的培养条件，使之形成完整植株或生产出具有一定经济价值的生物产品的一种技术。 内容及范畴 植株培养、茎尖培养、胚培养、胚珠和子房培养、花药与花粉培养、离体器官培养、胚乳培养、细胞培养、原生质体培养、离体授粉受精;植物组织培养概况及其在园林植物育种中的应用;经过40年的发展，园林植物育种中发展出：;(1)选择生长健壮的3cm～6cm长的新芽作外植体。 (2)用消了毒的利刃将新芽从从母体切下。 ;第三节 植物原生质体培养和细胞融合;（二）原生质体的分离方法;（三）原生质体的纯化;（四）原生质体的培养;二、原生质体融合;（一）原生质体融合的类型 自发融合、诱导融合 （二）诱导原生质体融合的方法及融合剂 盐类融合法、高钙和高pH融合、PEG法、电场融合等 （三）原生质体融合的步骤 参阅文献 （四）融合体的类型 自体融合、异体融合 （五）细胞杂种的选择和鉴定 互补选择法、可见标记法 （六）细胞杂种的再生和鉴定 形态鉴定、核型分析、分子标记鉴定;相关文献： 曹雪，戴忠良???秦文斌，潘跃平. 植物原生质体融合技术的研究进展.中国农学通报，2016，32(25)：84-90 张金鹏，韩玉珠，张晓旭，张广臣. 蔬菜原生质体培养及融合的研究现状与展望.北方园艺，2015（04）:192-195 孙宇涵，王欢，李云. 浅谈林木体细胞融合技术. 中国农学通报，2016，32(4)：136-143;（四）融合体的类型;第三节 基因工程;一、基因工程的概念以及研究概况;植物基因工程的优势;植物基因工程在植物遗传改良中的应用进展;二、植物基因工程的一般程序和方法;①目的基因的分离与克隆;a、图位克隆技术 染色体步移（chromosome walking)技术 染色体登陆（chromosome landing)技术 b、转座子或T-DNA标签法 c、PCR扩增克隆 d、以mRNA为基础的基因克隆 e、功能克隆;用于植物改良的主要外源基因;抗除草剂基因 ;图 苏云金杆菌的芽孢和伴孢晶体 ;抗虫基因类别： ;应用情况;郭三堆实验室新研制的sGKZ8杂交抗虫棉 中国“抗虫棉”之父;抗病基因;如梁小友等（1994）将抗病毒的CMV-cp基因和抗虫的Bt-toxin基因导入番茄，获得了再生的番茄植株。 赵淑珍等 (1994 )利用卫星DNA的互补DNA构造成抗CMV的转基因番茄，这种番茄能够干扰CMV的复制，减轻发病症状，表现出对CMV的显著抗性，且这种抗病性可以遗传。 ;抗烟草花叶病毒蛋白基因 抗白叶枯病基因 抗棉花枯萎病基因 抗烟草花叶病毒基因 黄瓜花叶病毒基因 以及小麦抗赤霉病、纹枯病和根腐病基因，花生、番茄青枯病，大白菜软腐病，柑橘溃疡病，桑树、桉树青枯病、根肿病等研究。 ;获得转基因抗病性状的植物有：烟草、番茄、棉花、大麦、燕麦草、小麦、马铃薯、水稻等。 除了外壳蛋白基因外，近年来国内外正在摸索多种抗病毒基因工程的新方法，包括卫星RNA、复制酶基因以及病毒复制抑制因子、核糖体失活蛋白、致病相关蛋白、核酸酶等。 我国培育的转基因抗黄瓜花叶病毒甜椒和番茄已实现商品化生产。 细菌病和真菌病的抗病基因工程研究基本上还处于实验室阶段。 ;抗环斑病(Papaya Ring spot virus, PRSV)转基因木瓜 ;抗逆境基因;刘岩等获得了耐盐性明显提高的转基因玉米植株。 张荃等获得了耐盐性提高的转基因番茄。 新疆石河子大学生物工程部用花粉管通道法将芦苇和细菌的耐盐碱基因导入小麦，育成抗盐碱转基因小麦253，