第二十章-病原性真菌.pptVIP

第二十章 病原性真菌 ;一、表面感染真菌 ;微生物检验;2．分离培养与鉴定 将鳞屑接种于含菜籽油的培养基，37℃孵育3d后，在培养基上开始生长，20d左右菌落约lOmm乳酪色酵母型菌落，表面光滑。取菌落作涂片染色镜检，观察真菌形态。 ;二、皮肤癣真菌;(一)临床意义;1．毛癣菌属;2. 表皮癣菌属;3．小孢子癣菌属;(三)微生物检验;2．直接显微镜检查 皮屑标本用10％KOH液制成湿片，指甲用25％KOH或25％NaOH含 5％甘油处理。镜检可见透明、有隔，常有分支的菌丝及成链的关节孢子，三个癣菌属难以鉴别。毛癣菌属感染病发有发外型和发内型孢子，而小孢子菌属只有发外型孢子。 ;3．分离培养与鉴定;毛发穿孔试验;4．药物敏感试验;三、皮下组织感染真菌;(一)着色真菌;1．临床意义;2．微生物特性;3. 微生物检验;(2)分离培养与鉴定;4．药物敏感试验;(二)孢子丝菌;孢子丝菌病是人兽共患性疾病，传染源是人和动物，传播途径主要经破损皮肤接触感染。经微小创口侵入皮肤后，创口局部出现炎症性小结，增大形成炎症性斑块或增生性糜烂。可沿淋巴管分布，引起亚急性和慢性肉芽肿，称为孢子丝菌性下疳。经呼吸道引起肺孢子丝菌病，并可沿血行播散至其他器官如骨、眼等。; 申克孢子丝菌是二相性真菌。在自然环境中或沙氏培养基上25℃～28℃培养时呈霉菌型(菌丝相)，而在组织内或在营养丰富的培养基上培养时为酵母型(组织相)。菌丝相可见菌丝两侧伸出细长分生孢子柄，末端长出成群梨状小分生孢子。组织相则可见卵圆形小体，形似雪茄烟状，常位于中性粒细胞或单核细胞内。在沙氏培养基上形成黑褐皱褶薄膜菌落，而在胱氨酸葡萄糖血琼脂培养基上则形成灰黄色柔软的类酵母型菌落。 ;3．微生物检验;(2)分离培养与鉴定：将标本接种于沙氏培养基上25℃培养，2-3d开始生长，初为白色湿润的酵母型菌落，以后变为淡咖啡色至深褐色。涂片染色镜检，可见典型的菌丝相的申克孢子丝菌。接种于胱氨酸葡萄糖血琼脂培养基上，37℃培养2-3d，可形成乳白色或淡褐色酵母型菌落。镜下可见G+卵圆形的孢子。;(3)药物敏感试验：对碘化钾、伊曲康唑、特比 萘芬等药物敏感。 (4)抗体检测：取患者血清做凝集试验，若抗体 效价大于l：320有诊断意义。 (5)动物接种：将标本接种小白鼠腹腔内，2周内 引起腹腔炎，取脓汁作涂片染色镜枪，可见 革兰阳性、卵圆形或梭形小体。;第二节 深部感染真菌;一、假丝酵母菌;(一)白假丝酵母菌;1．微生物特性;2．微生物检验 ;4)分离培养;鉴定;3)糖同化或发酵试验;(3)药物敏感试验：对二性霉素B、5-FC等药 物敏感，但对5-FC极易产生耐药性。 (4)抗体检测：早期诊断可用ELlSA夹心法、 免疫酶斑点试验，方法简便。也可用乳胶 凝集试验和对流免疫电泳试验等检测血清 中抗白假丝酵母菌抗体。 (5)动物试验：将假丝酵母菌悬液注射1ml于家 兔耳静脉或注射0.2ml于小白鼠尾静脉，假 丝酵母菌对动物无致病性。;(二)热带假丝酵母菌 ;微生物检验;TZC反应;二、隐球菌属;(１)微生物特性;（２）生物学多态性;(３)微生物检验;(2)抗原检测;(3)核酸检测;（４）分离培养;(５)鉴定;3）糖同化及发酵试验：能同化葡萄糖、 半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖 类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球 菌不能同化肌醇。;三、曲霉;微生物特性;微生物检验;(2)抗原检测：用竞争性ELISA测定病人血 清中曲霉抗原。 (3)分离培养与鉴定 标本接种沙氏琼脂， 室温培养后菌落形成快，呈毛状，一般 为黄绿色。将菌落涂片镜检可见特征性 的分子孢子头和足细胞。 ;(4)药物敏感试验 对制霉菌素和两性霉素B 敏感。 (5)抗体检测 检测病人血清中抗曲霉抗体。 常用免疫扩散检测，其敏感性和特异性 较高，也可用对流免疫电泳、ELISA、 生物素—亲和素联免疫吸附测定(BALISA)、 放射免疫测定(R1A)及间接免疫荧光法等。 菌丝和培养滤液可作ELISA抗原。 ;(6)皮肤试验 对过敏性支气管肺炎病人可 用曲霉抗原提取液作皮试。 Ⅰ型超敏反应在 15-20min发生阳性反应。 Ⅱ型超敏反应在4-10h出现阳性反应。 Ⅳ型超敏反应可出现于超敏反应型肺炎病人。;四、毛霉;毛霉病是一种发病急，进展快、病死率极高的系统性条件致病性真菌感染。尤其是慢性消耗性疾病如糖尿病、白血病、长期应用化疗、皮质类固醇激素的患者。临床上常见的是眼眶及中枢神经系统的毛霉病。