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微生物标本的处理 尿液样品采集和处理 通常留取晨起第一次尿液（此时尿液在膀胱内储存4h以上）；尿液采集后要及时送检，并保证2h内接种；不能及时送检和接种时，尿液应置4~8℃冰箱保存；冷藏样品应于8h内接种；怀疑沙门氏菌时，应于发病2w左右采集尿液，怀疑钩端螺旋体感染时，应于发病后2w采集尿液，上述时间此时阳性率高。尿液微生物学检验样品采集方法如下： 中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水或1:1000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，无菌生理盐水冲去消毒液，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5~10ml盛于带盖的无菌容器内送检。 导尿法：用导尿管导取10`15ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检（不可采集尿液收集袋中的尿液送检）。 集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁容器中留取24h尿液，取其沉渣10~15ml送检。 耻骨上膀胱穿刺法：培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用。 肾盂尿采集法：必须由临床医生采集。 注意事项：正常人的尿液是无菌的，除外尿道有正常菌群外，还有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌，故应该注意无菌采集。 粪便样品采集和处理 (1)采集时间： 腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便； 伤寒患者于发病2w以后采集粪便； 怀疑霍乱时立即采集粪便送检。 (2)采集方法： ①自然排便法：取新鲜粪便的粘液、脓血、或絮状物等有意义成分，2~3g或1~2ml，生物菌容器内或置于保存液或増茵液内送检；或疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中（ph8.6）。 ②直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难者及幼儿可采用此法，将拭子前段用无菌甘油或生理盐水湿润，然后插入肛门约4~5cm（幼儿2~3cm），轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。 痰及下呼吸道样品采集和处理 自然咳痰法：①晨痰为佳；②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿；③再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；④痰量不得少于1ml：⑤痰咳出困难时可先雾化吸入Nacl溶液（100g/L，加温到45℃）使痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24h痰。 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。 支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。 气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液。 气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或用支气管刷直接取得。 呼吸道样品采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次，立即放入无菌试管中。 注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。痰液样品要求涂片镜检：达到低倍镜视野中≤10个鳞状上皮细胞，以及≥25个白细胞方可送检。 血液及骨髓培养样品 学培养样品采集指征： 对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征： 发热（≥38℃）或低热（≤36℃） 寒热 白细胞增多（＞10×109/L，特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时） 粒细胞减少（未成熟的多核白细胞＜1×109/L） 血小板减少 皮肤黏膜出血 昏迷 多器官衰竭 最常用的方法为血液赠菌培养法。培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要8~10ml。儿童瓶为需痒瓶每瓶需血液1~3ml,另外，脑积液和胸腹水也可用血液赠菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，样品量与血液相同。 抗生素治疗前，严格无菌静脉采血8~10ml（儿童1~4ml）；不同时间或不同部位采取2~3份血液样品； 无菌注入专用培养瓶（成人、儿童、需氧瓶、厌氧瓶、L型菌需要不同培养瓶）中送检； 如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取不同时间的3份血液样品送检； 必要时可需氧菌、厌氧菌（占10％）和L型菌同时培养； 疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养； 必要时可取骨髓1~2ml，无菌注入专业培养瓶中送检。 注意事项：血液在正常情况下为无菌样品，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。一般病人在发病初期1~2天或发热高峰时采集血液样品，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。 脑脊液 采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好在应于抗生素之前采集脑脊液。 采集方法：无菌腰穿采集脑脊液3~5ml分装到3个无菌小瓶中（各1~2ml）。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少