生物分离工程选编.doc

第一章 绪论 一 生物分离工程的特点是什么？1 发酵液或培养液是 产物浓度很低的水溶液 2 培养液是多组分的混合物 3 生化产品的稳定性差 4 对最终产品的质量要求高 二 生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？三 在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ 1 采用步骤数最少 2 次序要相对合理 3 适应产品的技术规格 4 生产规模 5 进料组成 6 产品形式、产品的稳定性、物性 7 环保和安全要求 8 生产方式 第二章 细胞分离与破碎 一 如何预处理发酵液? 1. 高价无机离子的去除方法 去除钙离子：通常使用草酸。但由于草酸溶解度较小，不适合用量较大的场合。 去除镁离子：加入三聚磷酸钠，与镁离子形成络合物。 用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。例如：环丝氨酸的提取。 去除铁离子: 加入黄血盐，使其形成普鲁士蓝沉淀而除去。 2 杂蛋白质的除去 (1) 沉淀法 盐析 调节pH→pI (2) 吸附法 加入吸附剂或沉淀剂 (3) 变性法 加热，大幅度调节pH，加有机溶剂或表面活性剂等。 (4) 凝聚Coagulation和絮凝flocculation 目前工业上最常用的预处理方法之一。常用于菌体细小而且粘度大的发酵液的预处理。 3. 有色物质的去除及其他 (1) 使用吸附剂去除有色物质 离子交换剂、离子交换纤维、活性炭等 (2) 用工业酶制剂可净化发酵产物，除去干扰性浑浊物 淀粉酶：不溶性多糖 单糖 (3) 使用惰性助滤剂 硅藻土、纸浆、珍珠岩等 (4) 加入反应剂 环丝氨酸发酵液用CaO和H3PO4处理 二 凝聚和絮凝的区别 凝聚：向胶体悬浮液中加入电解质，由于双电层电位降低，使胶体体系不稳定，胶体粒子间因相互碰撞而产生凝集（1mm左右）的现象。常用的凝聚剂有：Al2(SO4)3.18H2O，AlCl3.6H2O，FeCl3，ZnSO4，MgCO3 絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大（10mm）的絮凝团的过程。 三 滤饼的重量比阻rB 表示单位滤饼厚度的阻力系数，是衡量过滤特性的主要指标。 对于不可压缩滤饼，比阻值为常数，但对于可压缩滤饼，rB = f（p）。 如忽略过滤介质的阻力，恒压下??过滤速率方程式为： q— 到瞬间τ，通过单位过滤面积的滤液量，m3/m2； ⊿p —操作压差，Pa； τ —过滤时间，s； μ — 滤液黏度，Pa.s; rB — 滤饼的重量比阻,m/kg; XB — 通过单位体积滤液所形成的滤饼干重,kg/m3; 在不同时间τ测定滤液量,根据过滤面积就可得q 值。以q为横轴，τ /q为纵轴作图，所得直线获得斜率（M）。 四 了解常用固-液分离设备及其特点 1 板框式压滤机 优点：结果简单、价格低廉、过滤面积大。 缺点：不能连续操作、劳动强度大、滤液澄清度不高。 2 鼓式真空过滤机 优点：能连续操作，实现自动化控制，适用于处理量大而固体含量较多的滤浆。 缺点：压差较小，不适用于滤饼阻力较大的物料。 3 错流过滤 优点：过滤速度快。 缺点：固液相的分离不太完全。 五 常用的细胞破碎方法, 了解机械破碎法所用设备 1. 机械破碎 1) 高压匀浆法 设备：高压匀浆器 2) 珠磨 设备：珠磨机 3）撞击破碎 设备：撞击破碎器 4）超声波破碎 设备：超声波探头 2. 非机械法 1）酶溶法 ① 外加酶法② 自溶法　 2）化学法 ① 酸碱处理② 化学渗透法 3）物理法 ① 渗透压冲击法② 冻融法 第三章 初级分离 一 常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 二 比较Ks盐析法和β盐析法 Ks盐析法由于蛋白质对离子强度的变化非常敏感，易产生共沉淀现象，因此常用于提取液的前处理。 β盐析法由于溶质溶解度变化缓慢，且变化幅度小，因此分辨率更高，常用于初步的纯化。 三 影响盐析的主要因素有哪些？ (一) 无机盐种类 (二) 温度和pH值 (三) 蛋白质浓度 四 用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？ ⑴ 温度：温度越低，沉淀越完全。－10℃ ⑵ 乙醇浓度：乙醇浓度上升，蛋白质溶解度下降。 ⑶ pH值：pI ⑷蛋白质浓度：应避免使用很稀的浓度， 蛋白质在高浓度下比较稳定。 五 泡沫分离定义、原理和操作过程影响因素 定义：泡沫分离是以气泡为介质，利用组分的表面活性差进行分离的一种方法。 原理：利用待分离物质本身具有表面活性或能与表面活性剂结合，在泡沫柱中被吸附在气泡表面，得以富集，气泡上升带出溶剂主体，达到净化主体液、浓缩待分离物质的目的。 影响因素：A 料液性质 溶液的pH值、离子强度和其他添加剂 B 表面活性剂 浓度不宜超过临界胶束浓度