基于单纯型设计和部件搜索方法的CHO细胞无血清培养基的高通量优化.pdfVIP

第 28 卷第 4 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.4 Vol.28 2014 年 8 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Aug. 2014 文章编号：1003-9015(2014)04-0777-07 基于单纯型设计和部件搜索方法的 CHO 细胞无血清培养基的高通量优化 李晓璐, 范 里, 赵 亮, 陈 飞, 谭文松 (华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 摘 要：氨基酸的浓度与配比对细胞生长和产物表达有重要作用。在自主研发无血清培养基的基础上，通过单纯型格 子实验设计优化氨基酸浓度及配比后发现，优化的无血清培养基明显促进了细胞生长。生物反应器批式培养中，最高 活细胞密度达 52.6×105 cells?mL?1，抗体融合蛋白产量 52.2 mg?L?1，相对于商业培养基 Ex-cell 302，分别提高了 26.7% 和 11.5%。在此基础上，通过部件搜索的方法确认具有显著正影响的氨基酸为谷氨酰胺、脯氨酸和甲硫氨酸。基于上述研 究工作，在 2 L 反应器采用自主研发的优化无血清培养基，以葡萄糖为关键控制参数，进行两阶段动态流加培养过程， CHO 细胞最大活细胞密度达 94.6×105 cells?mL?1，抗体融合蛋白终产量 600 mg?L?1，相对于商业培养基 Ex-cell 302 批 式培养，分别提高了 2.75 倍和 11.8 倍。本研究工作为抗体融合蛋白的高效工业化生产奠定了基础。 关键词：CHO 细胞；无血清培养基；高通量筛选技术；氨基酸优化 中图分类号：Q813.1 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-9015.2014.04.014 High Through-Put Screening and Optimization of Serum-free Media Development for CHO Cells Using Simplex Lattice and Elements Dialogue Design Methods LI Xiao-lu, FAN Li, ZHAO-liang, CHEN Fei, TAN Wen-song (State Key Lab of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract: Based on statistical analysis, cell growth was improved in optimized serum-free media via the optimization of the concentration and proportion of amino acids using simplex lattice and elements dialogue design methods. Using the optimized serum-free media, the maximum viable cell density (MVCD) and the maximum