常见的植物转基因技术及方法研究进展.pdfVIP

· 专题综述 · 北方 园艺2014(20)：184～188 常见的植物转基因技术及方法研究进展 徐 丽 萍，刘 树 英，于 淼，刘 洪 章 (吉林农业大学 生命科学学院，吉林 长春 130118) 摘 要：该研究总结了目前最常见的几种植物转基因方法：基因枪法、农杆菌介导法、花粉管 通道法、聚乙二醇介导法、病毒介导法的遗传转化原理，及其适用范围、应用实例和发展过程，并 对每一种方法的优缺点进行 了归纳和总结。 关键词：转基因方法；基因枪法；农杆菌介导法；花粉管通道法；聚乙二醇介导法；病毒介导法 中图分类号：Q943．2 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2014)20--0184--05 植物转基因技术 (transgenictechnology)，又称遗传 然而随着人们对转化机理的了解以及转化方法的 转化技术 (genetictrans{ormation)，是指把从动物、植物 改进农杆菌的宿主范围已经逐步拓宽。酚类化合物的 或微生物中分离到的目的基因或者经过修饰的基因导 添加能够促进农杆菌内Ti或 质粒 DNA上的 v／r基 入植物体内，使 目的基因能够在受体内进行稳定的表达 因的诱导，并加强细菌在植物细胞上的吸附力 ，从而提 和遗传并赋予植物人们所需的性状。由于转基因技术 高转化率。由此农杆菌介导法逐渐开始应用于单子叶 的发展能够克服常规育种手段培育时间长、工作量大等 植物的基因转化研究，尤其是禾谷类作物。Wu等 研 方面的不足，2O世纪8O年代以来，研究者们在不断的实 究发现，侵染和共培养培养基中加入 200mmol／I酚类 践探索中建立起多种植物转基因技术体系，人们从分子 化合物乙酰丁香酮和 0．01 的表面活性剂 Silwet—I77 水平对生物学和遗传学有了更为深刻的认知，并且结合 能显著提高小麦幼胚农杆菌转化中T—DNA的转移效 组织培养技术 ，基因工程技术已开始应用于植物基因组 率。Cheng等[2于 1997年首次以刚剥离的幼胚 、预培养 的修饰和改变，外源基 因(如抗虫或抗病基因等)的导 的幼胚和幼胚愈伤组织为受体获得农杆菌介导的转基 人，新的基因型的出现，实现了基因型改 良，从而为植物 因小麦植株 。到 目前为止，农杆菌介导的转基因小麦不 的遗传育种开辟了广阔前景，至今植物转基因技术的研 单单只局限在选择标记基因和 GUS报告基因建立和优 究与应用在世界各地蓬勃发展，并创造 了巨大 的经济 化转化体系，已经逐渐走向优质基因的应用。fie等 效益。 成功的利用农杆菌介导法将胆碱脱氢酶基因(betA)导 1 载体介导法 人小麦中，试验结果证明转基因植株小麦体内渗透调节 1．1 农杆菌介导法 物甜菜碱的含量大大提高，从而提高小麦 的抗旱性 ，农 农杆 菌是一种革 兰 氏阴性 土壤杆菌。1907年， 杆菌介导的单子叶植物转化试验在水稻、玉米上也取得 Smith和Townsent发现它是植物致瘤的起因，它感染大 了成功。人类食物的7O 为禾谷类作物，所以单子叶植 多数双子叶植物的受伤部位形成肿瘤，能够诱发冠瘿瘤 物的基因工程研究对人类具有十分重要的意义。Zhang 的称为根癌农杆菌，诱导毛状根的称为发根农杆菌，它 等_l4利用原始的紫花新疆大叶苜蓿愈伤组织建立苜蓿 对寄主细胞的转化是借助诱导根癌农杆菌(Agrobacte— 再生体系，并对紫花菖蓿再生体系进行优化。选择生长 riurntumefaciens)的Ti(Tumerinduce)质粒或发根农杆 力旺盛的愈伤组织将 2个谷氨酰胺合成酶(GS1和G