刺参机体酵母菌组成及其拮抗活性的研究.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 大 连 海 洋 大 学 学 报? ???．?????．?? ?????年 ???月? ??????????????????????????????????? ???．??????? 文章编号 ：????— ????????????—????—??? 刺参 机体 酵 母 菌 组成 及 其 拮抗 活 性 的研 究? 李 明?，马悦欣?，刘 志明?，杨 志平?，包鹏云?，宋坚? ??．大连海洋大学 农业部北 方海水增养殖重点实验室 ，辽宁 大连 ??????；?．大连汇新钛设备 开发有限公司 ，辽宁 大连 ???????? 摘 要 ：采用 ???、???、???培养基从刺参 ?????????????????????的体表、肠道和呼吸树分离出??株酵母? 菌 ，使用玻璃珠破 碎方法提取其 ???，然后用 酵母 菌通用 引物 ??一?／??一?从 ???中成 功扩增 出????????? 片段 ，将 ???产物进行测序 ，将各菌株序列在 ???????数据 库 中进行检 索 ，从 ?????比对结 果 中取相 似性? 最高的序列 ，用 ??????．?软件对所有序列进行聚类分析 ，采用邻接法构建 系统发育树 。结果表明 ：从 大连? 柏岚子海域刺参 中分离 出的菌株分别 属于红酵母属 、梅奇酵母属和丝孢酵母属 ，从 大连市黑石礁海域 刺参? 中分离出的菌株分别属 于红酵母属、假丝酵母属 、德 巴利氏酵母 属、有孢 汉逊酵母 属和毕赤 酵母属 ；以 ?? 株刺参病 原菌作为指示菌 ，采用双层琼脂扩散法对分离菌株 的拮抗 活性进 行测定 ，获得拈抗 酵母 菌 ??株 ，? 占总测试 菌株 的 ??．?％ ，从 刺参机体 的体表 、肠道 和呼吸树可 以筛选 出不 同得率的活性菌株 ，其抗菌谱 和? 活性强度 各不相 同 ，其 中 ???菌株的抗菌谱最广 ，抗菌活性最强 ；从肠道分离 出的拮抗菌 ???、???和 ???? 菌株 的胞外产物经硫酸铵沉淀后也具有抗菌活性 ，???菌株胞外产物经 ??％硫 酸铵 沉淀获得 的粗提物对 热? 和蛋 白酶 ?敏感 ，表明其拮抗物质为蛋 白质。? 关键 词 ：刺参；酵母菌；抗菌活性? 中图分 类号 ：????．?? 文献标 志码 ：?? 刺 参 ??????????????????????是 中 国北 方 地 区 重? 在为进一步筛选防治刺参病害的益生菌提供参考。? 要的海珍品之一 ，具有较高的营养价值、经济价值? ? 材料与方法? 和药用价值 ，目前 已形成较大的产业规模。随着养? 殖密度的增加以及海水污染程度的 日益严重，各种? ?．? 材 料? 疾病也随之而来 ，病害已成为限制刺参养殖业发展? 刺参样 品于 ????年 ?月和 ????年 ??月分别? 的重