构建食品级植酸酶黑曲霉工程菌 (1).pdfVIP

? 黧? 辙熊魅糖?娥礴《?耀? ?????????????：????：／／??? ．? ?????????．???? ? ? ???????????? ?? 熊 ? 构建?食 品?级植酸酶黑 曲霉工程菌? 陈璐 璐? 江连 洲? 邓 晨旭? 刘 君? 李 杰? ?东北农业大学 生命科 学学院 农业生物功能基因黑龙江高校重点实验 室，哈尔滨 ??????；?东北农业大学 食品学院，哈尔滨 ??????? 通讯作者，????? ? ? ????????．???? 摘 要 植 酸是 植物 种 子 中肌 醇 和磷 的主 要 存在 形式 ，由于单 胃动物 体 内缺 乏能分 解 植酸 的酶 ，以植酸? 磷形式存在的磷难 以被单胃动物吸收。植酸酶作为饲料添加剂已经广泛应用 ，但在食品中的应用研究刚? 刚开 始 。本 研 究 以黑 曲霉 ???????????????????????????基 因组 ???为 模板 ，???扩增 植 酸酶 基 因片段 ，并? 在 其 两端 加 上 糖 化 酶基 因??? ?的 ?’同源 臂和 ?’同源 臂 ，构 建 农杆 菌 ??质 粒 基 因置 换 载 体 ?????????。? 通过农杆菌???????????????????????????介导法转化黑 曲霉，筛选 以植酸酶基因替换糖化酶基因的同源重? 组转化子 ，以实现植酸酶基因的高效表达 。结果表 明，筛选 获得 ?株 同源重组转化子 ，同源重组率为? ???％，通过 分 光光 度 计法 测 定重 组 植酸 酶 菌株 的最 高 发酵 酶 活为 ???．???／??，为 出发 菌株 的 ??．?倍 ，证? 明植 酸 酶???基 因 是可 以在 黑 曲霉 糖 化 酶生 产 菌 中实 现 高效 表达 。本