利用油体蛋白体外重组技术实现牛肠激酶固定化应用.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 湖 北 农 业 科 学? ???．?????．?? ???．．????? ????年 ?月? ??????????????????????????? 利用油体蛋 白体外重组技术实现牛肠激酶固定化应用? 董 立强???，李? 梅 ?，张燕燕 ???，孙文 丽 ?陈红 漫?，刘 昱辉? ??．沈 阳农 业 大 学 生 物 科 学 技 术 学 院 ，沈 阳? ??????；?．中 国农 业 科 学 院 生 物 技 术 研 究 所 ，北 京? ???????? 摘 要 ：为研 究 利 用 油 体 蛋 白体 外 重 组 技 术 实现 肠 激 酶 固定 化 应 用 的 可 行 性 ，利 用 油体 蛋 白 ???????、自剪? 切 蛋 白 ??????和 人 工 合 成 的 牛 肠 激 酶轻 链 ?????????????，???????，分 别 构 建 表 达 盒 ??????— ???????— ??? 和 ??????— ??，插 入 毕 赤 酵 母 表 达 载 体 ??????，转 化 毕 赤 酵 母 ?????，甲 醇诱 导表 达后 通 过 ???????? 和? ??????—????检 测发 现 ．带 有 ??????一肠 激 酶 表 达 盒 的 阳性 菌株 ??有 目的 蛋 白的 表 达 ，而 ???????— ??????一肠? 激 酶 融合 蛋 白表 达 盒 不 能在 酵母 中表 达 。? 关 键 词 ：油体 蛋 白 ；人 工 油体 ??肠 激 酶 ；固定 化 酶? 中图分类 号：?????．?；????．?? 文献标识码 ：?? 文章编号 ：????—????????????—???????? ?? ? ???????????????????????????????????????????????????????????? ????? ???????????????????? ???????— ?