分子生物学3-相关基础知识幻灯片1.pptVIP

第三讲　相关基础知识;一、生物大分子;1、生命物质的十三个层次;2、生物大分子;3、生物大分子聚合体;4、细胞“系”;复制（replication） 以DNA为模板,按碱基互补配对原则,聚合成新的DNA链的过程。 ;1、DNA的半保留复制;实验依据;半保留复制的意义;DNA复制的一般过程;;;大肠杆菌的DNA复制;定点开始双向复制;三、DNA损伤与修复;（1）紫外线引起的DNA损伤;;（二）DNA损伤的后果;（三）DNA修复;（1）光修复;;;2、切除修复;切除修复：先切除DNA损伤序列，再合成补充切除的片段;3、重组修复;4、SOS修复;（四）基因突变;四、转录、复制、翻译;(2)解开DNA的双螺旋。负责解开双螺旋的酶是解螺旋酶(helicase)。原核生物的RNA聚合酶具有解螺旋酶的功能，但是真核生物的RNA聚合酶没有，其DNA的双螺旋系由特定的转录因子解开。;(3)以DNA的一股为模板合成RNA，所用的原料是核苷三磷酸(nucleoside triphosphates, NTPs)。 (4)终止转录。真核生物和原核生物利用不同的信号终止转录。（注：遗传密码的终止密码子代表肽链合成的终止，并非转录的终止）。 在真核生物里，与DNA结合的组蛋白会阻碍RNA聚合酶和DNA的作用，因此需要其他转录因子来应付此种情况。 ;;RNA转录;2、复制;3、翻译：以mRNA为模板合成肽链的过程称翻译。 4、逆转录：以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下利用宿主细胞中4种dNTP为原料在引物的3’端以5’－3’方向合成与RNA互补的DNA链（cDNA）的过程称逆转录。 ;复制、转录与逆转录的区别;五、转录的基础;3、启动子(promoter)：;4、DNA指导的RNA聚合酶;大肠杆菌的RNA聚合酶含有五个亚单元：a两个，b、b‘及σ各一个。 真核生物的RNA聚合酶有三种：Pol I、Pol II及Pol III。其中最主要的是Pol II，参与所有蛋白质基因以及大部分snRNA基因的转录。Pol I位於细胞核的核仁，负责合成5S以外的rRNA。Pol III位於核仁外，负责合成tRNA、5S rRNA、U6 snRNA及一些小RNA(如7SL、7SK、7SM 等)。这三种聚合酶各由十几个亚单元组成，其中四个与大肠杆菌RNA聚合酶的a、b和b类似。不过，真核生物的RNA聚合酶并不包含类似σ因子的亚单元。它需藉助於一般性转录因子才能来到启动子区域，发挥聚合酶的功能。;5、终止子;;6、增强子;增强子的作用特征：;六、转录调控元件与因子;七、基因扩增的概念;八、DNA探针;探针的来源