HPLC法测定红穿破石中大黄素的含量的论文.docVIP

　　HPLC法测定红穿破石中大黄素的含量的论文 【摘要】 目的 建立红穿破石中大黄素含量的高效液相色谱测定方法。方法 选用eclipse xdb-c18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)为流动相,检测波长为285 nm。结果 大黄素在0.0063～0.063 μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为102.0%,rsd＝1.58%(n＝6)。结论 本法简便,准确,可用于红穿破石中大黄素的含量测定。 【关键词】 红穿破石；大黄素；高效液相色谱法 abstract：objective to establish a hplc method for determining emodin in radix et caulis ventilaginis leiocarpae. methods stationary phase m×150 mm, 5 μm), mobile phase ethanol-0.1%phosphoric (75∶25), detection , flol/min and column temperature odin (r＝0.999 9). the average recovery of emodin ethod is rapid and accurate. it can be applied to control the quality of radix et caulis ventilaginis leiocarpae. 　　key odin；hplc 红穿破石为鼠李科植物翼核果ventilago leiocarpa benth.的干燥根和老茎,主产于广西等地[1],具有清热利湿、利尿通淋的作用,特别是对消石具有特殊功效,民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗,现已有多个制药厂家把它作为治疗结石症的重要组方。.王氏等[2]报道,从广西产红穿破石根和茎中分离到大黄素、大黄素甲醚、1,2,4,8-四羟基-3-甲基蒽醌、翼核果醌-ⅰ、翼核果素,其中大黄素为该植物的主要化学成分。有关红穿破石的主成分含量测定尚未见报道。本试验采用hplc法对红穿破石中大黄素进行含量测定,为药材生产和质量标准提供科学依据。 　　1 仪器与试药 　　美国agilent1100系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱和agilent1100化学工作站),bug40型超声波清洗器(上海必能信有限公司)。 　　大黄素对照品(批号110756-200110,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上；红穿破石由广西玉林制药有限责任公司提供,来源于广西各地,经广西玉林制药有限责任公司中药鉴定室专家鉴定。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　agilent eclipse xdb-c18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μl。理论板数按大黄素计算应不低于3 000。在此色谱条件下,红穿破石样品能够达到基线分离(见图1)。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1 ml含大黄素6.3 μg的溶液,作为对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取红穿破石粉末适量,取0.4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 ml,称定重量,超声30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。 　　2.4 线性关系的考察 分别精密吸取大黄素对照品溶液(6.3 μg/ml)1、2、4、6、8、10 ml,置于10 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μl,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：y＝4 172.28a＋0.46,r＝0.999 9,结果表明,大黄素在0.006 3～0.063 μg范围内呈良好的线性关系。 　　2.5 精密度试验 取大黄素对照品溶液,各重复进样6次,测定峰面积,结果大黄素峰面积值为265.8、268.5、265.8、268.3、267.9、267.7,rsd＝0.4%。表明具有较好的精密度。 　　2.6 重现性试验 取同一批的样品6份,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,测定大黄素峰面积,结果为222.2、223.9、222.0、225.2、223.7、222.6,rsd＝0.5%。