HSG和MMP3在不同乳腺组织中的表达的论文.docVIP

　　HSG和MMP3在不同乳腺组织中的表达的论文 【摘要】 目的 探讨新的增殖抑制基因(hyperplasia suppressor gene,hsg)和基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase3,mmp3）在不同乳腺组织中的表达。方法 应用免疫组化方法检测唐山市工人医院58例乳腺癌标本，33例乳腺纤维瘤标本，30例乳腺增生标本和15例正常乳腺组织标本hsg和mmp3的表达。结果 58例乳腺癌组织中hsg和mmp3的表达率分别为44.83%（26/58）和84.48%（49/58），与正常乳腺组织和良性乳腺纤维腺瘤比较，乳腺癌组hsg表达率下降，mmp3表达率升高，差异有显著性（plt;0.05）；乳腺癌组hsg低表达，与淋巴结转移有关（plt;0.05）,与肿瘤大小、年龄和临床病理分级无关， mmp3高表达与肿瘤大小和淋巴结转移等无关。另外，在乳腺癌组、乳腺增生组、乳腺纤维腺瘤组和正常乳腺组织中，hsg与mmp3无明显相关性。结论 hsg和mmp3在不同乳腺组织中表达量的不同，提示hsg和mmp3与乳腺癌的发生、发展有着密切关系。 【关键词】 乳腺肿瘤 hsg 免疫组织化学 基质金属蛋白酶 增殖抑制基因(hyperplasia suppressor gene hsg)是陈光慧等［1］利用差异显示技术对ooth cell vsmc)的cdna文库进行筛选时分离得到的一个新基因，实验证明，在高血压模型中这一基因可以明显抑制血管再狭窄，动脉粥样硬化等心血管疾病的细胞增殖，迁徙和再塑，减轻和防治试验性心血管疾病的发生。.最近的研究发现[2]hsg对多种肿瘤细胞系具有抗增殖及诱导凋亡的作用，特别是乳腺癌细胞系bm1。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，mmps)是含有9种酶蛋白分子的家族，可以导致基质膜和细胞间质成份破坏与降解，在恶性肿瘤的侵袭与转移中发挥重要作用。基质金属蛋白酶3 （matrix metalloproteinase3，mmp3），又称基质分解素1（stromelysin1）是其中的一种，目前国内外对mmp3在肿瘤中作用的研究较少，且多集中在恶性肿瘤浸润和转移过程中的作用[3]，对于癌变发生之前即恶性肿瘤的演变过程中，mmp3的表达状况和所起作用尚未见文献报道。本实验通过检测正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌等各组中，hsg和mmp3的表达状况，探讨它们与乳腺癌发生、发展的关系，为乳腺癌的诊断和治疗提供新的实验依据和参考指标。 1 资料与方法 1.1 临床资料 收集唐山市工人医院2005年1月～2006年6月手术切除的乳腺增生标本30例，乳腺纤维瘤标本33例和乳腺癌标本58例，年龄41～69岁，中位年龄58岁。肿瘤tnm分期ⅰ期10例，ⅱ期37例，ⅲ期11例。其中浸润性导管癌43例，浸润性小叶癌11例，小叶原位癌1例，腺管样癌1例，导管内癌2例。肿瘤直径范围1～5cm，淋巴结转移者33例，无转移者25例。所有标本均经病理诊断证实，术前未接受过放化疗治疗。2006年1～6月，唐山市工人医院病理诊断为乳腺癌患者行乳腺癌根治术，手术切除远离乳腺癌病灶的相对正常乳腺（距肿瘤边缘gt;5cm,病理证实无肿瘤浸润）组织标本15例，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋。所有标本均检测雌、孕激素受体（er、pr）。 1.2 试剂 兔抗人hsg多克隆抗体，为北京大学陈光慧教授馈赠；鼠抗人mmp3 (工作液)单克隆抗体,购自美国zymed公司，二步法免疫组化试剂盒pv9000、dab及枸橼酸盐均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3 免疫组织化学检测 采用 pv9000 二步法免疫组化检测系统（北京中杉金桥生物技术有限公司）进行染色。一抗选用兔抗人hsg多克隆抗体（稀释度1∶100）和鼠抗人mmp3(工作液)单克隆抗体。用已知的乳腺癌阳性组织切片做阳性对照，用pbs代替一抗做空白对照具体实验步骤参照北京中杉二步法免疫组化试剂盒pv9000说明书进行。 1.4 结果判定 hsg阳性染色主要集中于细胞质，呈棕黄色颗粒， 见图1～4。mmp3阳性表达部位主要在细胞浆中，呈棕黄色,见图5、6。采用阳性细胞百分比法进行半定量分析：计数100个细胞呈现的阳性细胞数，结合显色强弱分别为：阴性（）不显色，弱阳性（+）lt;25%,中度阳性（++）26%～50%，强阳性（+++）gt;50%。er、pr阳性为胞浆和（或）胞核染色强度明显高于背景。 1.5 统计学方法 所有数据用spss13.0软件，对其进行卡方检验、方差分析和相关性分析，统计学检验以plt;0.05为差异有显著性。 2 结果 2.1 hsg和