第7章微生物的测定.pptVIP

第七章 微生物的测定;一、分类;总酸度、pH值、还原糖含量 食品中微生物的检测 细菌总数 大肠菌群数 食品添加剂的检测 甜味剂－糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜。 防腐剂－苯甲酸、山梨酸;二、微生物检验;流程;（1）样品的无菌处理;（2）稀释、接种;琼脂培养基配方;根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基[可放置在（（46±1）0C）水浴锅内保温]注入平皿15ml，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。;菌落计数方法;稀释度的选择;简便方法：菌落总数测定纸;使用方法;2、大肠菌群的测定;流程;培养基配方;伊红美蓝培养基：;伊红美兰琼脂平板划线培养大肠菌群的典型菌落;革兰氏染色阴性菌;纸片法;MPN表;革兰氏染色;分光光度计使用方法;;2．使用方法 （1）预热仪器 将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。 （2）选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 （3）固定灵敏度档 使用时，调到“1”挡。 （4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此时试样室是打开的）。 （5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。 （6）吸光度的测定 将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值??为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。 重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。 （8）关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。 3．注意事项 （1）为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光路切断，以延长光电管的使用寿命。 （2）取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。 （3）比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。