基因重组糖蛋白-人尿激酶原糖基化修饰的质谱测定.pdfVIP

第 卷 分析化学 研究报告 第 期 33 (FENXI ~UAXUE D Z 年 月 Z005 Z Chi nese Jour nal of Anal ytical Che mistr y 145 ~149 … … ……………… … 研 究 报 告 … … … … … … … … … 基因重组糖蛋白 人尿激酶原糖基化修饰的质谱测定 - 代景泉 李晓海 蔡 耘 钱小红。 军事医学科学院放射医学研究所 北京 ( 100850 D 摘 要 酶法结合生物质谱技术测定了基因重组糖蛋白 人尿激酶原 的 糖含量 唾液酸含量分 - (r hPro UK D N- ~ 别为 和 糖蛋白 肽先经 凝集素亲和富集 肽 糖苷酶 对 糖基化位点进行 9 5 G / Con A = N- F (PNGase F D N- 特异性质量标记 然后利用 技术测定出 糖基化位点在第 位天冬酰胺残基上 LC- MS/MS N- 30Z G 关键词 重组人尿激酶原 基质辅助激光解吸附飞行时间质谱 液相色谱 质谱联用 糖蛋白 糖基化位 - N- N- 点 唾液酸 引 言 l 尿激酶原 是一种新型的蛋白类溶栓药物[1 ] 不同表达系统得到的 (Pr our oki nase Pr o UK D G Pr o UK 有着不同的糖基化水 平 利用鼠杂交瘤 细胞系 培 养 得 到 的 有 糖 基 化 现 象[Z ] 而 在 G SPZ/0 Pr o UK E . 表达系统得到的重组蛋白则不发生糖基化[3 ] 是否发生糖基化对尿激酶原活性有显著的影响[4