反相流动注射-化学发光法测定氢化可的松.pdfVIP

第 32 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究报告 第 ll 期 2004 年 ll 月 Chinese JOurnaI Of AnaIyticaI Chemistry l47l ~ l474 反相流动注射-化学发光法测定氢化可的松 范顺利＊l 李 薇l 林金明l 王学锋2 （l 中国科学院生态环境研究中心，北京 l00085） （2 河南师范大学化学与环境科学学院，河南省环境污染控制重点实验室，新乡 453002） 摘 要 在碱性介质中，氢化可的松可被 （ ）3 - 氧化产生化学发光，奎宁对此发光反应有显著的增敏作 Fe CN 6 用。据此，建立了反相流动注射-化学发光法测定氢化可的松的新方法。方法的线性范围和检出限分别为 0. 05 ~ 50 mg / L 和 0. 02 mg / L，相对标准偏差（! = ll， = l. 0 mg / L）为 0. 9% 。方法用于药物中氢化可的松含 量的测定，结果与标准方法分光光度法测定结果吻合 关键词 反相流动注射，化学发光，氢化可的松 ! 引 言 氢化可的松（HydrOcOrtisOne，简写为 Hd）为临床上常用的抗炎甾体类激素药物。目前，测定氢化可 的松的方法主要有分光光度法［l ~ 3］、荧光光度法［4，5］、高效液相色谱法［6 ~ 8］及毛细管电泳法［9］等，用化学 发光法测定氢化可的松虽有文献报道［l0，ll］，但均是基于甾类有机物对 2 - 化学发光体系的增敏 Ce!-SO3 作用建立的，选择性较差，测定范围及灵敏度也不够理想，单独测定氢化可的松尚须配合高效液相色谱 等分离手段。研究发现，在 NaOH 碱性介质中，铁氰化钾可以直接氧化氢化可的松产生化学发光，奎宁 对该反应具有显著的增敏作用。据此，提出了一种测定氢化可的松的化学发光新体系。并结合反相流 动注射技术，建立起一种直接测定氢化可的松的新方法。该方法简单，测定快速，与文献报道的利用 2 - 发光体系测定氢化可的松的方法相比，灵敏度高出近两个数量级，且测定范围大，选择性有 Ce!-SO3 一定改善。无须采取预分离措施，用于药物中氢化可的松含量的测定，结果满意。 # 实验部分 #. ! 仪器与试剂 BPCL 微弱发光测量仪（ 中国科学院生物物理研究所）；IFFL-D 型智能流动注射化学发光分析仪 （西安瑞科电子设备有限公司）。氢化可的松标准储备液（l00 mg / L）：在体积分数为 20% 的乙腈溶液 中，用氢化可的松对照品（中国药品生物制品检定所）配制；铁氰化钾储备液：5. 0 l0 - 2 mOI / L；NaOH 溶液：l. 5 mOI / L；奎宁储备液（l. 0 l0 - 2 mOI / L）：用 0. l mOI / L 的硫酸配制。其余试剂均为分析纯，水 为二次去离子水。 #. # 实验方法 按图 l 所示，铁氰化钾由八通阀定量注入（75 L）经三通混合的待测氢化可的松和 NaOH 载流中 进行化学发光反应，光电倍增管检测发光信号，相对发光强度与氢化可的松浓度成正比。 $ 结果与讨论 $. ! 化学发光的动力学特性实验及机理探讨 采用 微弱发光测量仪进行了