胸腺内注射Fas抗体对心脏移植大鼠Fas.docVIP

　　胸腺内注射Fas抗体对心脏移植大鼠Fas 【摘要】 目的：研究受体胸腺内注射fas抗体对心脏移植大鼠fas/fasl表达的影响。方法：应用大鼠同种异位腹腔心脏移植模型,将模型动物随机分为三组，每组8只动物。a组：移植前后不给予处置；b组：给环孢素a，按每日8mg/kg于术前1d口服；c组：胸腺注射fas抗体，以0.1mg/kg剂量在术前注射。以免疫组化法和逆转聚合酶链式反应（rt-pcr）法观察术后移植心脏局部的fas及fasl的表达情况。结果：与a组相比,受体胸腺内注射fas抗体可减少移植心脏局部的fas/fasl基因表达（rt-pcr法半定量结果plt;0.05）和蛋白表达（免疫组化法plt;0.05）。结论：受体胸腺内注射fas抗体是一种有效的抑制心脏移植急性排斥反应的方法，可使移植心肌局部fas/fasl表达下调。 【关键词】 抗原，cd95；心脏移植；移植物排斥 influence of intrathymic injection of antifas monoclonal antibody on fasfasl after heart transplantation/an yingchun,zhang guochun,zhang jingmindepartment of cardiology，qinhuangdao port hospital,qinhuangdao,hebei,066002,chinaabstract：objective:to investigate the influence of intrathymic injection of antifas monoclonal antibody on fas/fasl of rats after heart transplantation.methods:using rat allograft heterotopic heart transplantation models，rats ly divided into three groups:group a(control group),group b(ic injection of antifas monoclonal antibody before test). the number of rats of every group ples munohistochemical method.results:pared to group a，intrathymic injection of anti-fas monoclonal antibody significantly decreased the gene express (rt-pcr，semiquantitative) and protein level (immunohistochemistry) of fas/fasl on the transplanted heart (plt;0.05).conclusion:intrathymic injection of anti-fas monoclonal antibody has a immunosuppressive effect on acute reject reaction and dog／kg的剂量于术前一天始口服），c组（胸腺注射fas抗体，以0.1mg/kg的剂量在术前一天注射）。 　　1.2 主要实验方法 　　1.2.1 心脏移植模型的建立：将ono术式稍加改进，具体步骤：（1）受体手术：取腹正中切口，在10倍手术显微镜下打开后腹膜。将腹主动脉、下腔静脉与周围组织稍加游离，在肾动、静脉与髂动、静脉水平之间，结扎小的动、静脉分支，大的分支用血管夹阻断。用温盐水纱布敷盖受体腹部切口；（2）供体手术：经肝静脉给予肝素静推（1.5mg/kg），剪开胸腔，心包，暴露心脏，剪断肝静脉，从下腔静脉注入0～4℃心脏停跳液（改良的st thomas停跳液），到心脏停止跳动。在无名动脉起始部切断升主动脉，在肺动脉分叉处切断肺总动脉，切断左、右上腔静脉，下腔静脉，肺静脉等其余组织，取下心脏，置于0-4℃冰生理盐水中；（3）心脏移植：供体取心结束后，打开受体腹部纱布，暴露腹主动脉、下腔静脉。在10倍手术显微镜下进行心脏血管与受体血管吻合。数秒后移植心脏自动复跳；（4）关闭腹腔。 　　1.2.2 实验标本采集：每组实验动物在移植后7d处死。剪下移植心脏,取部分左心室游离壁心肌（0.6cm×0.6cm）,立即置于-80℃冰箱中备rt-pcr。 　　1.2.3 rt-pcr法检测移植心肌的fas/fasl的表达：trizol rna 提取试剂盒提取心肌组织中的总rna；按逆转录试剂盒说明