蛋白激酶Cα、CyclinD1和Cdk4在大肠癌中表达的相关性的论文.docVIP

　　蛋白激酶Cα、CyclinD1和Cdk4在大肠癌中表达的相关性的论文 【摘要】 目的 探讨pkcα,cyclind1和cdk4在大肠癌中表达的相关性及其与临床病理学特征的关系。方法 应用免疫组化sp法对83例大肠组织中pkcα,cyclind1和cdk4的表达进行检测。结果 pkcα在大肠癌组织中阳性表达31/47（66.0%）与正常组织3/15（20.0%）及腺瘤10/21（47.6%）相比差异有统计学意义（plt;0.05），与大肠癌分化程度，dukes分期，淋巴结转移及cea水平明显相关（plt;0.05）。cyclind1和cdk4在大肠癌中阳性表达分别为26/47（55.5%）、28/47（59.6%），与正常组织中2/15（13.3%）、1/15（6.70%）及腺瘤组织中8/21(38.1%)、9/21（42.9%）相比呈递增趋势（plt;0.05）。大肠癌中cyclind1阳性表达与肿瘤分化程度，dukes分期，淋巴结转移呈正相关（plt;0.05），而与cea水平关系不大（p＞0.05）；cdk4阳性表达则与分化程度，dukes分期有关（plt;0.05），与淋巴结转移及cea水平关系不密切（p＞0.05）。pkcα与cyclind1呈正相关关系（r=0.348,plt;0.05），cyclind1和cdk4呈正相关关系（r=0.393,plt;0.05），pkcα和cdk4则无明显相关性（r=0.167,p＞0.05）。结论 蛋白激酶cα与cyclind1及cdk4的过表达在大肠癌的发生、发展中起着重要的协同作用。.三者的过表达与大肠癌的分化程度，dukes分期密切相关。 【关键词】 pkcα cyclind1 cdk4 免疫组织化学 真核生物细胞周期失控是细胞过度增殖及癌变的重要原因[1]。pkcα作为一种磷脂依赖性丝／苏氨酸蛋白激酶，可通过调节细胞周期g1期相关周期蛋白的水平而影响g1/s期的进程，从而参与细胞增殖、分化等生理病理过程。本研究从蛋白水平探讨pkcα,cyclind1和cdk4在大肠癌中表达的相关性及其与大肠癌临床病理学特征的关系。 1 资料与方法 1.1 标本 收集三峡大学第一临床医学院2004年3月～2006年3月间手术切除大肠癌标本47例，其中男32例，女15例。年龄23～76岁，平均年龄(53.2±1.76)岁。高中分化型33例，低分化型14例。有淋巴结转移22例，无淋巴结转移25例。dukes分期：a+b期25例，c+d期22例。另收集大肠腺瘤21例，正常大肠组织15例。所有患者术前均未行放疗和化疗。所有标本经10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋，连续切片，行免疫组织化学染色。 1.2 免疫组化染色 采用免疫组化sp法，pkcα单抗购自武汉博士德生物工程有限公司。cyclind1、cdk4及sp试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。pkcα、cyclind1、cdk4单抗均行微波抗原修复（温度92℃～98℃，持续20min），每批染色均设立阴性和阳性对照，免疫组化染色具体步骤按试剂盒说明进行。 1.3 结果判定 pkcα阳性着色定位于细胞浆；cyclind1阳性着色定位于细胞核；cdk4阳性着色定位于细胞核和细胞浆。以细胞中相应部位出现棕黄色颗粒为阳性细胞。参照fromoan等级相关对pkcα、cyclind1和cdk4在大肠癌中表达的相关性进行分析。以α=0.05为检验水准。 2 结果 2.1 pkcα在大肠正常组织、腺瘤及癌组织中的表达 pkcα主要定位于细胞浆，见图1。pkcα在大肠癌中阳性表达（31/47，66.0%）明显高于正常组织（3/15，20.0%）和腺瘤组织（10/21，47.6%），与后两者相比差异有统计学意义（plt;0.05）。pkcα阳性表达与大肠癌分化程度低，dukes分期晚及淋巴结有转移，cea水平高密切相关（plt;0.05）。 2.2 cyclind1、cdk4在大肠正常组织、腺瘤及癌组织中的表达 cyclind1以细胞核着色为主，见图2。cyclind1在大肠癌中阳性表达（26/47，55.3%）与正常组织（2/15，13.3%）及腺瘤组织（8/21，38.1%）相比，差异有统计学意义（plt;0.05）。cyclind1阳性表达与大肠癌分化程度低，dukes分期晚及淋巴结转移显著相关（plt;0.05），而与cea水平无密切关系（pgt;0.05）。 cdk4在细胞核及细胞浆均有着色，以细胞浆为主，见图3。cdk4在大肠癌中阳性表达（28/47，59.6%）与正常组织（1/15，6.7%）及腺瘤组织（9/21，42.9%）相比，差异有统计学意义（plt;0.05）。cdk4阳