多重逆转录聚合酶链反应检测常见呼吸道病毒.pdfVIP

1372 重庆医学 2010 年 6 月第 39 卷第 11 期 ·论著· 多重逆转录聚合酶链反应检测常见呼吸道病毒锋 帅维正，李 琦 A ，王长征，最福云，陈华萍，魏征华，李 璋 〈第二军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所，重庆 400037) 摘 要:目的 建立一种可同时快速检测引起人呼吸道感染的重要病毒病原的检测方法。方法 通过对 PCR 反应条件的优 化，建立同时检测季节性甲型流感病毒 (INF A)、乙型流感病毒 (INFB) 、人鼻病毒 (HRV) 和甲型 HINl $?.感病毒 (HIN 川的多重 RT-PCR 方法。结果 该法可同时或分别扩增 INFA 212 bp , INFB 489 bp 、 HRV 380 bp 和 HINl 153 bp 的基因片段。检测的敏 感性分别为 10 、 10 ， 10 3 、 10 copies/mL 。采用相同的反应体系和条件，分别对其他 6 种常见病原体(包括肺炎链球菌、肺炎克雷 伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌核酸)进行扩增，均未检测出扩增产物。结论 此种多重 RT-PCR 法 适用于 4 种重要呼吸道病毒的快速貌别。 关键词:多重 RT-PCR; 流感病毒 5 人鼻病毒 s 甲型 H1Nl$.或感病毒 中图分类号 :R562;R446.61 文献标识码 :A 文章编号: 1671-8348(2010) 11-1372-03 Development of a multipJex RT-PCR to detect four important respiratoηviruses SHUAI Wei-zheng .LI QiL. ? WANG Chang-zheng .et al. Institute of Restiratory Diseases 01 PLA .Xinqiao Hosρ ital. Third Military Medical University .Chongqing 400037.China) Abstract:Objective To develop a technique of simultaneously and rapidly detecting important viral pathogens which may cause respiratory infections. Methods Under optimized PCR conditions.a multiplex PCR technique was developed to simultaneously de? tect seasonal influenza A virus I NFA) 、 influenza B virus (INFB人 Human rhinovirus (HRV) and Novel Swine-Origin Influenza A Virus (HIND. Results Four specific PCR products.212 bp for INFA.489 bp for INFB.380 bp for HRV and 153 bp for HINl. were amplified respectively. The LOD of INFA. INFB. HRV and HIN1 were 10 、 10 、