植物组织中总糖和还原糖的测定.pptVIP

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2017-04-28 发布于四川
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植物组织中总糖和还原糖的测定.ppt

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植物组织中总糖和还原糖的测定

实验一;1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。 2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。;1、还原糖：指含有游离的半缩醛(酮)基糖。单糖都是还原糖；某些二糖是还原糖（如麦芽糖、乳糖等）；多糖为非还原糖。 2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。 ; 2、还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂反应：在碱性条件下，还原糖与DNS试剂反应，还原糖被氧化成糖酸及其它产物， DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。; 3、在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质(3-氨基-5-硝基水杨酸)颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光??度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。 ;1、实验材料：苹果（约0.5 g） 2、仪器：水浴锅；可见分光光度计等。 3、试剂：（1）1 mg/mL葡萄糖标准液（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂(碱性) （3）6M HCl和6M NaOH ; ;1、葡萄糖标准曲线的绘制: 取7支试管，按下表操作，以标准葡萄糖含量为横坐标，对应的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。;2、还原糖的提取;3、样品含糖量的测定: 取提取液1.0ml，按上表操作。; 还原糖含量(μg/ g )=;六、思考题：