梅花鹿茸I型胶原对破骨细胞的影响及其分子机制.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 24 期 2013 年 12 月 ·3503· 梅花鹿茸 I 型胶原对破骨细胞的影响及其分子机制 王艳双 1, 2，罗 速 2*，张大方 1*，曲晓波 1*，王秀丽 2，谭寅凤 2，李 枫 2 1. 长春中医药大学，吉林 长春 130117 2. 北华大学，吉林 吉林 132013 摘 要：目的 探讨梅花鹿茸 Ι 型胶原（SPC-Ι）对破骨细胞的影响及其分子机制。方法 采用全骨髓细胞诱导法培养破骨细胞、 成骨细胞。设对照组（给予完全培养液）、诱导组（给予高糖-DMEM 诱导液）、SPC-Ι（2.5、5、10 g/L）组，除对照组外，其他 组给予含核因子-κB 受体活化因子配体（RANKL）、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）各 40 ng/mL 的高糖-DMEM 诱导液，条件 培养 7 d，每隔 3 天更换培养液补足药物质量浓度。经 HE 染色、抗酒石酸盐性磷酸酶（TRAP）染色，倒置显微镜下观察细胞 形态；分光光度计检测 TRAP 活性，RT-PCR 法检测 TRAP、核因子-κB 受体活化因子（RANK）、RANKL、骨保护素（OPG） 基因的表达，Western blotting 法检测 RANK 蛋白的表达。结果 与破骨细胞组比较，SPC-Ι 5、10 g/L 组 TRAP 阳性细胞减少， TRAP 活性降低，TRAP、RANK、RANKL 基因的表达及 RANK 蛋白的表达下调（P＜0.01）；与对照组比较，质量浓度 2.5、10 g/L 组 OPG 基因表达上调，RANKL/OPG 的值减小（P＜0.01），2.5 g/L 质量浓度组的作用不显著。结论 SPC-Ι 对破骨细胞的生 成及分化具有抑制作用，该作用通过 RANKL/OPG 信号转导途径调控 TRAP 基因、RANK 基因的表达实现的。 关键词：梅花鹿茸 I 型胶原；破骨细胞；成骨细胞；抗酒石酸盐性磷酸酶；核因子-κB 受体活化因子；RANKL/OPG 信号通路 中图分类号：R282.710.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)24 - 3503 - 07 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.24.014 Effects of sika pilose antler type I collagen on osteoclast and its molecular mechanism WANG Yan-shuang1, 2, LUO Su2, ZHANG Da-fang1, QU Xiao-bo1, WANG Xiu-li2, TAN Yin-feng2, LI Feng2 1. Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun 130117, China 2. Beihua University, Jilin 132013, China Abstract: Objective To explore the effect of sika pilose antler type I collagen (SPC-I) on osteoclast and its molecular mechanism. Methods The osteoclasts and osteoblasts were cultured by the induction method of whole bone marrow cells.