抗人CD33单克隆抗体(HIM34、WM53、M195)抗原识别表位的论文.docVIP

　　抗人CD33单克隆抗体(HIM34、WM53、M195)抗原识别表位的论文 【摘要】 目的：确定抗人cd33单克隆抗体(him34、53、m195)抗原识别表位所在区域，进而阐明抗体识别表位不同于其介导的生物学作用之间的关系。方法：将四个cd33胞外区不同长度的基因片段定向克隆入真核表达载体pdisplay，构建成真核表达载体pdisplay/ep1、2、3、4，分别将空载体和构建的质粒通过磷酸钙沉淀法转染入293t细胞，瞬时转染48小时后利用流式细胞仪通过抗血凝素a（ha）抗体标记以检测各质粒在细胞表面的表达, 同时检测him34、53、m195和不同区段的结合活性。结果：抗人cd33单克隆抗体him34能识别pdisplay/ep1、2、3表达的蛋白，53能识别pdisplay/ep1表达的蛋白，m195则均能识别四个片段所表达的蛋白。结论：him34、53、m195识别的cd33抗原表位分别位于115～170、17～60、170～262氨基酸。 　 【关键词】 cd33 单克隆抗体 抗原表位 白血病 　　preliminary study of antigenic epitopes recognized by mab(him34,53,m195) against human cd33 　　zuo yufeng, in, tian zheng, chen ling, qu hao, atology, chinese academy of medical sciences peking union medical college, tianjin 300020, china 　　［abstract］ objective:to identify the regions of antigenic epitopes recognized by monoclonal antibodies(mab)(him34,53,m195) against human cd33.methods:four different length gene fragments of human cd33 extracellular region e into the mammalian expression vector pdisplay. then these constructed and control plasmids phosphatedna coprecipitation. fortyeight hours after transfection, the efficiency of transfection agglutinin a）mab.the regions of cd33 antigen recognized by anticd33 antibodies(him34,53,m195) ab him34. the proteins expressed by pdisplay/ep1 ab 53. the proteins expressed by pdisplay/ep1, 2, 3 and 4 ab m195.conclusion:the antigenic epitopes recognized by him34 are located in the amino acid residue(aar) 115170 of cd33 antigen. the antigenic epitopes recognized by 53 are located in the aar 1760 of cd33 antigen. the antigenic epitopes recognized by m195 are located in the aar 170262 of cd33 antigen. 　　［key onoclonal antibody；antigenic epitope；leukemia 　　him34、53、m195是不同克隆的抗cd33单克隆抗体。.目前基础和临床研究较多的是人源化m195(hum195)，在hum195上连接肿瘤抗生素制备成gemtuzumab ozogamicin（go）或连接放射性同位素用于急性髓系白血病（aml）的治疗。2000年5月美国食品药品监督管理局（fda）批准了go上市，该药适用于年龄gt;60岁的首次复发及那些不能耐受化疗毒性的cd33+ aml患者，标志抗cd33抗体治疗aml进入了一个新阶段［1］。未标记的hum195特异地结合cd33后，除通过巨噬细胞的吞噬作用、激活补体及抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（adcc）来杀伤肿瘤细胞，最新