2016高中生物专题1第1节DNA重组技术的基本工具新人教版选修3探究.ppt

基因工程;;第一节　DNA重组技术的基本工具;目 标 定 位;;1．认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 2．简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。(重、难点) 3．简述基因工程中载体需要具备的条件。(重点);;一、基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过①_____________和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在②________水平上进行设计和施工的，因此又叫做③_____________。 二、DNA重组技术的基本工具 1．工具简介 (1)“分子手术刀”——④________ (2)“分子缝合针”——⑤________ (3)“分子运输车”——⑥________;2．限制性核酸内切酶 (1)来源：主要是从⑦________中分离纯化出来的。 (2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的⑧___________断开，因此具有⑨________性。大多数限制酶的识别序列由⑩________个核苷酸组成。经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：?________和?________。前者是限制酶在它识别序列的?_______________将DNA的两条链切开产生的，后者是限制酶在它识别序列的?________切开产生的。; 3．DNA连接酶 (1)分类：根据酶的来源不同，可分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为?________________；另一类是从?________中分离出来的，称为T4DNA连接酶。 (2)两种DNA连接酶的比较： 相同点：都缝合?________键。;黏性末端;有一个至多个限制酶切割位点 ;[思维激活]　 1．不同的限制酶具有不同的识别序列，说明限制酶具有什么特点？ 2．作为运载工具的载体，要求必须对受体细胞无害，为什么？ [答案]　 1．专一性 2．载体如果对受体细胞有害，其一旦被导入受体细胞，就会影响受体细胞的生命活动，甚至破坏受体的生命活动。;;一、对基因工程概念的理解;知识贴士：基因工程得以实现的理论基础： ①所有生物的DNA都是以4种脱氧核苷酸为基本单位，构成独特的双螺旋结构，这为不同种生物DNA拼接成功提供物质基础。 ②所有生物共用一套遗传密码子，为某生物的基因能够在其他生物细胞内正常指导蛋白质的合成提供可能。;二、基因工程的工具 1．限制性核酸内切酶 (1)来源：这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)种类：迄今已从近300种不同的微生物中分离出了约4000种限制酶。 (3)特点：①主要切割外源DNA，而对自身的DNA不起作用，达到保护自身的目的；②只能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列；③只能在特定的部位进行切割。 (4)结果：形成黏性末端或平末端。 (5)实质：使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。; 知识贴士： ①若限制酶切割后形成的是黏性末端，则形成的两个黏性末端是反向重复序列。 ②大多数限制酶的识别序列为6个核苷酸组成，例如EcoRI、SmaI限制酶识别序列由6个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。;2．DNA连接酶; 以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。; [解析]　分析以上4个DNA片段，可清楚分析出①③为平末端，连接酶应用T4DNA连接酶；②④为黏性末端且相同，连接时应用E·coliDNA连接酶。 [答案]　(1)③　平　T4DNA连接酶　(2)②　④　黏性　E·coliDNA连接酶;已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如右图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是(　　) A．3 B．4 C．9 D．12;[答案]　C [解析]　每一种限制性内切酶切割DNA后会留下特征性的黏性末端，同时一次切割后，会把DNA分割成两个片段，且不同的限制酶切后的片段不一样，如果将题图中的三个切割位点自左至右依次标为甲、乙、丙，只在甲处切，可产生两个片段，即a和右边的b＋c＋d段，如果只在乙处切，就有a＋b和c＋d段，如果只在丙处切，就有a＋b＋c和d段，在甲、乙两处同时切，就有a、b和c＋d段，在乙、丙处同时切，就有a＋b和c、d段，在甲、丙两处同时切，就有a、b＋c、d段三种片段，在甲、乙、丙三处同时切，就有a、b、c、d四种片段。所以本题应该选C。;3．“分子运输车”——载体 (1)作用：